Chad Baker/Photodisc/Getty Images
La microbiologie étudie les organismes trop petits pour l'œil nu. Comme il est impossible de les observer dans la nature, les chercheurs les cultivent en laboratoire, en utilisant des techniques spécialisées telles que le repiquage pour maintenir des populations saines.
Les micro-organismes ont besoin d’un « foyer » qui leur fournit des nutriments, élimine les déchets et offre une structure physique adaptée. Les « maison » les plus courantes sont les bouillons liquides et les géloses semi-solides, chacun étant formulé pour soutenir la croissance générale ou pour favoriser des espèces spécifiques.
À mesure que les cellules se métabolisent, leur milieu peut s’épuiser en nutriments et accumuler des sous-produits toxiques. Le repiquage (transfert d'un petit inoculum sur un milieu frais) empêche la prolifération, maintient la contamination à un faible niveau et garantit des résultats expérimentaux cohérents.
Les échantillons environnementaux ou cliniques contiennent souvent des communautés mixtes. En étalant un échantillon sur de la gélose avec une anse d'inoculation, vous étalez les cellules suffisamment finement pour que chaque colonie résultante provienne d'un seul micro-organisme. Cet isolement est la première étape vers une identification précise des espèces.
Une fois que des colonies distinctes sont visibles, une deuxième sous-culture peut être réalisée en sélectionnant une seule colonie et en la transférant dans un bouillon frais ou une plaque de gélose. La culture résultante est maintenant une souche pure, prête pour les tests biochimiques, le séquençage ou les tests de sensibilité aux antibiotiques.
Un repiquage efficace nécessite une technique stérile, un timing approprié (généralement 24 à 48 heures pour les bactéries à croissance rapide) et une connaissance des besoins de croissance de l’organisme. Pour des protocoles détaillés, consultez les Directives microbiologiques du CDC .
