Voici pourquoi:
* Précipitation d'ARN: L'éthanol aide à précipiter l'ARN de la solution. L'ARN est très soluble dans l'eau, mais lorsque l'éthanol est ajouté, il réduit la solubilité de l'ARN, ce qui le fait sortir de la solution comme précipité solide.
* laver les impuretés: Pendant l'étape de lavage, l'éthanol aide à éliminer les contaminants tels que les sels, les protéines et autres débris cellulaires qui peuvent être présents dans l'échantillon d'ARN.
comment cela fonctionne:
1. déshydratation: L'éthanol est un agent déshydratant, ce qui signifie qu'il élimine l'eau de la solution. Cette réduction de la teneur en eau réduit la solubilité de l'ARN, entraînant des précipitations.
2. Effet de sel: Dans la plupart des protocoles d'extraction d'ARN, une solution saline comme l'acétate de sodium est ajoutée avant l'éthanol. Ce sel aide à neutraliser la charge négative de la molécule d'ARN, la rendant moins soluble dans l'eau et plus susceptible de précipiter.
3. sélectivité: Alors que l'éthanol précipite l'ARN, il ne précipite pas l'ADN aussi efficacement. Cela permet de garantir que l'échantillon d'ARN final est relativement exempt de contamination de l'ADN.
Considérations importantes:
* Concentration d'éthanol: La concentration d'éthanol utilisée dans l'extraction d'ARN est cruciale. Une concentration trop faible peut ne pas être efficace pour précipiter l'ARN, tandis que une concentration trop élevée peut entraîner la précipitation d'autres composants indésirables. L'éthanol à 75% est couramment utilisé car il fournit un équilibre optimal pour les précipitations et le lavage.
* Température: Les précipitations d'éthanol sont généralement effectuées à basse température, souvent sur la glace ou à 4 ° C, pour minimiser la dégradation de l'ARN.
Dans l'ensemble, 75% de l'éthanol joue un rôle essentiel dans l'extraction d'ARN en précipitant l'ARN de la solution et en lavant les contaminants, assurant l'isolement de l'ARN pur et intact.
