Historiquement , le chloroforme a été utilisé dans le cadre d'une extraction du phénol-chloroforme méthode. Voici comment cela a fonctionné:

* lyse cellulaire: La première étape impliquait d'ouvrir les cellules pour libérer l'ADN.

* phénol: Le phénol a ensuite été ajouté au mélange. Le phénol est un dénaturant fort qui sépare les protéines de l'ADN.

* chloroforme: Le chloroforme a été ajouté pour créer un système biphasique , ce qui signifie deux couches formées. La couche supérieure contenait la solution aqueuse avec l'ADN, tandis que la couche inférieure contenait le phénol et les protéines dénaturées.

Pourquoi le chloroforme n'est plus utilisé:

* Sécurité: Le chloroforme est un composé toxique et cancérigène, posant un risque important pour les chercheurs.

* Efficacité: Les méthodes modernes comme les colonnes de spin ou l'extraction à base de billes magnétiques sont beaucoup plus rapides, plus faciles et plus sûres que les méthodes de phénol-chloroforme. Ces techniques reposent sur différents principes pour isoler l'ADN.

Au lieu du chloroforme, l'extraction d'ADN moderne utilise:

* tampons: Des tampons sont utilisés pour créer le bon pH et la concentration de sel pour lyser les cellules et séparer l'ADN des autres composants cellulaires.

* enzymes: Des enzymes comme la protéinase K sont utilisées pour digérer les protéines, séparant davantage l'ADN des autres composants cellulaires.

* Colonnes Spin ou perles magnétiques: Ces matériaux se lient à l'ADN, permettant son isolement et sa purification du reste de l'échantillon.

En résumé, alors que le chloroforme était autrefois utilisé dans l'extraction d'ADN, il n'est plus considéré comme une méthode sûre ou efficace. Les techniques d'extraction d'ADN modernes utilisent des méthodes alternatives pour obtenir les mêmes résultats avec une plus grande sécurité et facilité.