Lors de la chromatographie sur couche mince, un technicien place des taches d'un mélange chimique sur une plaque plane recouverte d'une couche de matériau absorbant, puis place la partie inférieure de la plaque dans un solvant. Au fur et à mesure que le solvant remonte la plaque, les produits chimiques dans le mélange se déplacent à des vitesses différentes, de sorte qu'ils se séparent. Ce test permet de déterminer quels produits chimiques se trouvent dans un mélange en comparant les vitesses de déplacement des inconnues aux normes connues. Les résultats, cependant, peuvent être affectés par de nombreux facteurs.
Facteurs de rétention
Le facteur de rétention d'un produit chimique lors de la chromatographie sur couche mince est une mesure de la distance qui le sépare de la plaque. le mouvement de solvant. Puisque le mouvement absolu du produit chimique dépendra de la distance parcourue par le solvant, les valeurs du facteur de rétention sont calculées par rapport au degré de déplacement du solvant. Le facteur de rétention d'un produit chimique est la distance verticale parcourue par le produit chimique depuis l'endroit où il a été initialement appliqué à la plaque, divisée par la distance parcourue par le solvant - mesurée à partir du même point de départ.
Thin Layer Plaque de chromatographie
La plaque de chromatographie sur couche mince elle-même peut affecter la valeur du facteur de rétention obtenue pour un produit chimique donné. Les plaques de Chromatographie sur couche mince peuvent être revêtues de divers solides absorbants; le plus souvent de la silice ou de l'alumine. Puisque le facteur de rétention est basé sur l'affinité relative du produit chimique pour l'absorbant comparé au solvant, le changement de l'absorbant peut grandement changer le facteur de rétention. De même, l'épaisseur et l'uniformité de la couche d'absorbant peuvent varier d'une plaque à l'autre, surtout si elles sont fabriquées à la main, ce qui est parfois le cas. Ces deux facteurs peuvent également modifier la valeur du facteur de rétention pour les produits chimiques.
Solvants
Puisque le solvant transporte le produit chimique vers le haut de la plaque, le solvant particulier aura également un impact important sur le facteur de rétention valeur pour le produit chimique. Un solvant qui a une interaction plus forte pour un produit chimique particulier surmonte plus facilement toute affinité du produit chimique pour la couche absorbante, et déplace ce produit chimique plus loin dans une période de temps donnée. Les mélanges de solvants peuvent également avoir des effets différents selon la proportion de chaque solvant.
Autres facteurs
Il y a quelques autres facteurs qui peuvent affecter le facteur de rétention dans certains cas. La température du solvant et de la plaque peut légèrement varier, car, par exemple, le solvant peut souvent mieux dissoudre les produits chimiques qu'il transporte à des températures plus élevées. La technique du technicien dans l'application de l'échantillon à la plaque peut également changer le facteur de rétention. Un effet potentiel est que l'application d'un trop grand nombre d'échantillons se traduira par de grandes bandes diffuses de produits chimiques remontant la plaque, rendant difficile la mesure précise de la distance parcourue par le produit chimique.