Lorsque vous testez l'effet du pH sur l'activité enzymatique, vous devez faire varier le pH. Cependant, vous pouvez le faire de bonnes ou de mauvaises façons. Gardez à l'esprit quels facteurs supplémentaires peuvent confondre les effets de la variation du pH. Sinon, les résultats obtenus peuvent ne pas être dus à la variation du pH, mais à d'autres facteurs. Savoir comment varier correctement le pH et quels facteurs peuvent fausser le pH d'une expérience vous aidera à obtenir de bons résultats et à comprendre pourquoi vos résultats pourraient ne pas correspondre exactement à vos attentes.
Changer une seule chose
Lors des tests l'effet du pH sur l'activité enzymatique, ne fait varier que le pH tout en maintenant d'autres facteurs constants. Ces autres facteurs comprennent la concentration enzymatique, la concentration du substrat et la température. Les facteurs qui restent constants sont appelés les variables de contrôle. Les variables de contrôle vous permettent de conclure que les résultats sur l'activité enzymatique obtenus dans votre expérience sont dus à la variation du pH, la variable indépendante. Il est tout aussi important de savoir quels facteurs ne doivent pas changer au cours d'une expérience que de savoir quel facteur varier. Dans le cas contraire, il sera difficile de déterminer si les résultats sont réellement dus à la seule chose testée. Ou une base
Le pH d'une solution peut être changé en dissolvant différentes quantités d'un acide ou d'une base dans l'eau. Une façon de tester l'effet du pH sur l'activité enzymatique est d'ajouter graduellement des gouttes d'un acide fort ou d'une base forte dans la solution contenant l'enzyme, puis d'observer le point auquel l'activité enzymatique ralentit ou s'arrête. Un acide est défini comme un composé qui donne un ion hydrogène, appelé proton (H +), et une base est définie comme un composé qui donne un ion hydroxyde (-OH). Différents acides et bases ont différents nombres de protons ou d'ions hydroxydes à donner. Tous les protons ou ions hydroxydes ne sont pas immédiatement donnés quand un acide ou une base est ajouté à une solution, mais le nombre de protons ou d'ions hydroxydes donnés change le pH à des vitesses différentes. Ainsi, c'est une bonne idée de faire varier le pH dans une expérience enzymatique en utilisant seulement un type d'acide ou un type de base. Dans le cas contraire, d'autres variables sont ajoutées involontairement.
Certaines expériences de laboratoire qui étudient l'activité enzymatique impliquent le broyage de tissus frais pour libérer les enzymes des cellules, puis l'ajout de substrat pour mesurer l'enzyme activité. Les tissus frais contiennent du sang. En raison de la présence d'enzymes dans le sang qui modifient le gaz carbonique dissous dans le sang en acide carbonique, le tissu lui-même peut affecter le pH. Ainsi, dans des expériences impliquant une activité enzymatique dans un tissu frais, il est utile de laver le sang dans un bécher d'eau froide avant de broyer le tissu. Cela minimisera le changement involontaire de pH dû au tissu, de sorte que le changement intentionnel du pH peut être étudié.
Gardez les tailles les mêmes
Comme discuté ci-dessus, la concentration enzymatique est un contrôle facteur qui ne devrait pas être varié lorsque l'on teste l'effet du pH sur l'activité enzymatique. Cependant, les procédures expérimentales modifient toujours intrinsèquement la concentration en enzymes de manière subtile. Si l'on utilise une solution pure d'enzymes, maintenir la concentration enzymatique constante. Cependant, dans des expériences dans lesquelles l'enzyme provient de tissus frais, tels que des morceaux de pomme de terre, des morceaux de plantes ou des morceaux de foie, la taille des morceaux change la quantité d'enzyme dans chaque tube à essai. Ainsi, il sera utile de couper les morceaux de tissu aussi uniformément que possible. Ceci est un autre exemple de comment savoir quoi ne pas changer, et pourquoi il est difficile de ne pas complètement changer, aide à interpréter les résultats de la variation d'un facteur tel que le pH.
