Jupiterimages/Photos.com/Getty Images
Le corps humain héberge environ neuf fois plus de cellules bactériennes que de cellules humaines. En microbiologie, une culture pure fait référence à une préparation de laboratoire, telle qu'une boîte de Pétri, qui contient une seule espèce bactérienne. L'identification et l'isolement de cette espèce sont essentiels pour une caractérisation précise et des applications en aval.
John Foxx/Stockbyte/Getty Images
Allumez un bec Bunsen et passez la boucle d'inoculation à travers la partie la plus chaude de la flamme jusqu'à ce qu'elle devienne rouge. Cette étape élimine tous les microbes résiduels.
Laissez la boucle refroidir pendant environ 10 secondes, puis plongez-la doucement dans l'échantillon microbien.
Ouvrez la plaque de gélose et faites glisser la boucle d’avant en arrière sur environ un tiers de la surface de la plaque. Restérilisez la boucle dans la flamme.
Touchez la boucle sur une région non inoculée de la gélose pour la refroidir. Faites pivoter la plaque de sorte que la section inoculée se trouve à gauche ou à droite, puis faites glisser la boucle à travers la zone inoculée et sur le tiers supérieur de la surface restante plusieurs fois. Restérilisez la boucle.
Refroidissez l'anse sur une zone propre de la gélose, faites pivoter la plaque de 90 ° supplémentaires et faites glisser l'anse à travers la zone précédemment inoculée avant de balayer la zone non inoculée restante.
Placez la plaque dans un incubateur (ou à température ambiante) et attendez que des colonies visibles apparaissent, généralement 24 à 48 heures ou plus selon l'organisme.
Restérilisez une nouvelle anse d'inoculation. Mettez-le en contact avec une seule colonie bien formée sur la plaque, puis transférez-le dans un tube incliné de gélose ou un tube de bouillon nutritif.
Incuber la pente ou le bouillon dans les mêmes conditions qu'auparavant. Après une croissance suffisante, la culture sera une préparation bactérienne pure.
Le fait de stries une plaque par étapes successives dilue la charge bactérienne, permettant ainsi la formation de colonies individuelles. Évitez toute contamination croisée excessive entre les zones de stries. L'incubation peut avoir lieu à température ambiante, mais l'utilisation d'un incubateur contrôlé optimise les conditions de croissance de l'organisme spécifique.
Lorsque vous travaillez avec des micro-organismes inconnus, la sécurité est primordiale :portez des gants, stérilisez soigneusement les surfaces après exposition et assurez-vous que l'anse d'inoculation est stérilisée avant et après chaque étape.
Br
Br
Frère
