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  • Quels micro-organismes prospèrent sur la gélose nutritive :un guide pratique

    Par Joan Reinbold • Mis à jour le 30 août 2022

    La gélose nutritive est un milieu polyvalent à usage général qui favorise la croissance d’un large spectre de bactéries, levures et moisissures non exigeantes. Sa composition fournit un apport équilibré en azote organique, carbone, vitamines et minéraux, ce qui en fait le cheval de bataille de nombreux laboratoires de microbiologie.

    Microorganismes qui prospèrent sur la gélose nutritive

    La gélose nutritive ne contenant aucun facteur de croissance particulier, elle est idéale pour la culture d’organismes qui ne nécessitent pas de substrats spécifiques. Les colonies typiques incluent les Streptocoques , Staphylocoque , Escherichia coli , et une variété d'isolats environnementaux. Organismes exigeants tels que Treponema pallidum (l'agent de la syphilis) restent incultivables sur ce milieu en raison de leurs exigences nutritionnelles uniques.

    Les chercheurs utilisent la gélose nutritive pour l’isolement de routine, le comptage des colonies et l’identification préliminaire. Il sert également à la surveillance de l'environnement en testant la contamination de l'eau, des eaux usées, des crustacés, de la viande et des produits laitiers.

    Ingrédients clés de la gélose nutritive

    La formulation standard est :

    • 0,5 % de peptone (hydrolysat de protéines)
    • 0,3 % d'extrait de bœuf (ou extrait de levure)
    • Gélose à 1,5 %
    • 0,5 % de chlorure de sodium

    Ces proportions peuvent varier légèrement selon le fabricant, mais le profil nutritionnel global reste cohérent.

    Comprendre l'agar, la peptone et l'extrait de bœuf

    Gélose

    L'agar est un polysaccharide complexe dérivé d'algues rouges marines. Il solidifie le milieu à 113°F (45°C) et fond à 203°F (95°C). Bien qu'elle fournisse un soutien structurel, la gélose n'offre aucune valeur nutritionnelle aux microbes.

    Peptone

    La peptone est une fraction protéique soluble produite par hydrolyse partielle de protéines animales ou végétales. Il fournit de l'azote organique, certains acides aminés et des vitamines mineures, favorisant une croissance microbienne robuste.

    Extrait de bœuf

    L'extrait de bœuf est un mélange hydrosoluble d'acides aminés, de peptides, de nucléotides, de vitamines et de minéraux dérivés du tissu de bœuf bouilli. Il favorise la croissance d’un large éventail de bactéries. L'extrait de levure est un substitut acceptable, offrant des nutriments similaires.

    Préparer la gélose nutritive

    1. Pesez 28 g de poudre d'agar nutritive et dissolvez-la dans 1 L d'eau distillée.
    2. Chauffer à ébullition tout en remuant pour assurer une dissolution complète (≈1 minute).
    3. Autoclaver à 121°C (250°F) pendant 15 minutes.
    4. Laisser refroidir à ~45°C (110°F) avant de verser.
    5. Distribuer dans des boîtes ou des tubes de Pétri stériles ; couvrir et laisser solidifier.
    6. Conservez les assiettes à l'envers dans un environnement sombre et réfrigéré pour éviter la condensation.

    Le pH final doit être de 6,8, donnant un milieu gélatineux légèrement ambré et ferme. Lorsqu'elles sont conservées à 4°C, les plaques restent viables jusqu'à deux ans, sauf contamination visible.

    Stockage et durée de conservation

    Conserver les assiettes au réfrigérateur, couvertes et à l'envers. Évitez de les exposer à la lumière ou aux variations de température. Inspectez les changements de couleur, la nébulosité ou la contamination microbienne avant utilisation.

    Le respect de ces directives garantit une culture fiable d'organismes non exigeants et des évaluations microbiologiques précises.

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