1. Microscopie:
* microscopie optique (LM): Il s'agit de la forme la plus élémentaire de microscopie. Il utilise une lumière visible pour éclairer et agrandir l'échantillon.
* Microscopie à champ lumineux: Le type le plus courant, il produit une image où l'échantillon est sombre sur un fond lumineux.
* Microscopie à contraste de phase: Cette technique améliore le contraste des échantillons transparents en exploitant les différences dans l'indice de réfraction.
* Microscopie de contraste d'interférence différentielle (DIC): Cette technique utilise une lumière polarisée pour créer une image de type 3D avec un contraste amélioré.
* Microscopie à fluorescence: Cette technique utilise des colorants fluorescents qui se lient à des composants cellulaires spécifiques, permettant la visualisation de ces composants.
* Microscopie électronique (EM): Ce type de microscopie utilise des électrons pour éclairer l'échantillon, offrant une résolution beaucoup plus élevée que la microscopie optique. Cela permet la visualisation des structures au niveau du nanomètre.
* Microscopie électronique à transmission (TEM): Un faisceau d'électrons est passé à travers l'échantillon, créant une image 2D des structures internes.
* Microscopie électronique à balayage (SEM): Un faisceau d'électrons est scanné à travers la surface de l'échantillon, créant une image 3D de la surface.
2. Techniques de coloration:
* coloration implique d'utiliser des colorants pour colorer des composants cellulaires spécifiques, les rendant visibles au microscope. Certaines taches courantes comprennent:
* coloration de l'hématoxyline et de l'éosine (H&E): Une coloration histologique commune utilisée pour visualiser les noyaux et le cytoplasme des cellules.
* coloration de Gram: Utilisé pour différencier les bactéries en fonction de leur structure de paroi cellulaire.
* Coloration de l'immunofluorescence: Utilise des anticorps fluorescents qui se lient à des protéines ou des molécules spécifiques dans la cellule.
3. Fractionnement cellulaire:
* Ce processus consiste à briser les cellules ouvertes et à séparer leurs composants en fonction de la taille et de la densité. Ceci est réalisé par:
* centrifugation: Tourne un échantillon à grande vitesse, séparant différents composants en couches.
* Centrifugation différentielle: Utilise différentes vitesses pour isoler des organites spécifiques.
4. Techniques moléculaires:
* immunocytochimie: Utilise des anticorps pour détecter des protéines spécifiques dans les cellules.
* hybridation in situ: Utilise des sondes d'ADN ou d'ARN marquées pour détecter des séquences spécifiques dans les cellules.
* techniques d'édition de gènes: Permettre la manipulation de gènes spécifiques dans les cellules, permettant aux scientifiques d'étudier la fonction de ces gènes.
5. Autres techniques:
* Crystallographie aux rayons X: Utilisé pour déterminer la structure 3D des protéines et d'autres molécules.
* microscopie cryo-électron (cryo-em): Une forme spécialisée de microscopie électronique qui permet la visualisation des structures à une résolution presque atomique.
Choisir la bonne technique:
Le choix de la technique dépend du type de cellule spécifique, des structures à observer et du niveau de détail souhaité. Par exemple, la microscopie optique peut être suffisante pour visualiser la structure globale d'une cellule, tandis que la microscopie électronique est nécessaire pour visualiser la structure détaillée des organites.
Remarque: Chaque technique a ses propres limitations et avantages. Les chercheurs combinent souvent plusieurs techniques pour obtenir une compréhension complète de la structure et de la fonction cellulaires.
