1. Préparation de l'explant:
* Sélection du matériel source: Le matériel végétal sain et sans maladie est sélectionné, généralement à partir du bourgeon apical, des segments de tige ou des tissus foliaires.
* stérilisation: Le matériau choisi est stérilisé à l'aide de désinfectants comme le blanchissement ou l'éthanol pour éliminer tout microbe contaminant.
2. Initiation de la culture:
* Placement de l'explant: L'explant stérilisé est placé sur un milieu de culture contenant des nutriments et des hormones spécifiques, tels que les auxines et les cytokinines. Ce milieu simule les conditions nécessaires à la croissance des plantes.
* Environnement stérile: La culture est maintenue dans un environnement stérile, généralement dans une chambre de croissance ou un incubateur, pour éviter la contamination.
3. Induction et multiplication des cals:
* Formation des cals: L'explant subit une division cellulaire, formant une masse de cellules indifférenciées appelées callosités. Ceci est souvent induit en ajoutant des hormones spécifiques au milieu de culture.
* Multiplication Callus: Le cal est sous-cultivé sur des médias frais pour augmenter son volume.
4. Induction de la prise de vue:
* Shift hormonal: La concentration hormonale dans le milieu est ajustée pour favoriser le développement des pousses. Les cytokinines sont généralement utilisées pour encourager la formation de pousses.
* Développement des pousses: Les pousses se développent à partir du cal, résultant en un groupe de plantules.
5. Induction racine:
* Déplace des hormones à nouveau: Le milieu est à nouveau ajusté pour induire la formation de racines. Cela implique généralement d'augmenter la concentration d'auxines.
* Développement racine: Les racines se développent sur les plantes, en les préparant pour la transplantation.
6. Acclimatation et transplantation:
* durcissement: Les plantules sont progressivement acclimatées à des conditions environnementales externes, telles que la lumière du soleil, l'humidité et la température, en les transférant dans une serre ou une chambre de croissance avec une exposition croissante à ces facteurs.
* Transplantation: Une fois que les plantules sont suffisamment durcies, elles sont transplantées sur le sol ou d'autres supports de croissance.
Avantages du clonage des plantes cultivées dans la culture tissulaire:
* Multiplication rapide: Un grand nombre de plantes identiques peuvent être produites rapidement à partir d'un seul explant, permettant une propagation efficace.
* Plantes sans maladie: Le processus élimine les maladies virales et autres présentes dans le matériau végétal d'origine.
* Uniformité génétique: Toutes les plantes clonées sont génétiquement identiques, conduisant à des caractéristiques cohérentes des plantes.
* Préservation des espèces rares: Cette méthode peut être utilisée pour préserver et se propager des espèces végétales menacées ou rares.
Limitations:
* Coût et expertise: La culture des tissus nécessite un équipement spécialisé, des installations stériles et du personnel formé, ce qui en fait un processus coûteux.
* Variation génétique: Les clones sont génétiquement identiques, limitant leur adaptabilité à différentes conditions environnementales.
* Embryogenèse somatique: Dans certains cas, le processus peut conduire à la formation d'embryons somatiques, qui pourraient ne pas se développer en plantes normales.
