1. Système d'électrophorèse:
* gel: Les types les plus courants sont l'agarose et le polyacrylamide. Les gels d'agarose sont utilisés pour des molécules plus grandes, tandis que les gels de polyacrylamide sont utilisés pour des molécules plus petites.
* tampon: Une solution d'électrolyte qui mène de l'électricité et maintient le pH du gel.
* alimentation: Fournit le courant électrique qui entraîne la migration des molécules.
* peigne: Crée des puits dans le gel où les échantillons sont chargés.
2. Préparation des échantillons:
* Exemple: Il peut s'agir d'ADN, d'ARN, de protéines ou d'autres molécules que vous souhaitez séparer.
* Dye de chargement: Contient un colorant de suivi qui vous permet de surveiller la progression de l'électrophorèse et une solution dense pour aider l'échantillon à couler dans le puits.
3. Détection et analyse:
* teinture: Utilisé pour visualiser les molécules séparées. Les taches courantes comprennent:
* bromure d'éthidium (ETBR) pour l'ADN et l'ARN (fluoresces sous la lumière UV)
* coomassie bleu pour les protéines
* Système d'imagerie: Un système qui peut capturer et analyser le gel coloré, comme un transilluminateur UV, un système de documentation de gel ou un scanner.
* Logiciel: Pour analyser les résultats, mesurer la taille des bandes et calculer les poids moléculaires.
4. Autres équipements:
* pipettes: Utilisé pour charger avec précision les échantillons dans les puits de gel.
* Micropipette: Une petite pipette qui mesure de très petits volumes de liquide.
* gants: Pour protéger vos mains contre les produits chimiques et les taches.
Mesures de clés dans l'électrophorèse:
* Distance de migration: La distance parcourue par une molécule du puits à sa position finale sur le gel.
* mobilité: Une mesure de la vitesse à laquelle une molécule se déplace dans un champ électrique.
* Poids moléculaire: La taille de la molécule, qui peut être estimée en fonction de sa distance de migration par rapport aux normes connues.
* Concentration: La quantité d'une molécule présente dans un échantillon, qui peut être mesurée par l'intensité de la bande colorée.
En utilisant cet équipement et en suivant des protocoles établis, les scientifiques peuvent efficacement séparer et analyser les biomolécules en utilisant l'électrophorèse.
