CFU signifie Colony Forming Units, un terme en microbiologie utilisé pour quantifier le nombre de bactéries présentes dans une solution. Selon la concentration de votre échantillon, vous devrez effectuer plusieurs dilutions et plaquer les différents échantillons sur des boîtes de Pétri. S'il y a trop de colonies bactériennes, elles seront difficiles à compter, et s'il y en a trop peu, l'échantillon peut ne pas être représentatif. Il est généralement recommandé de conditionner la solution d'origine, puis une dilution 1/10 (1 partie de solution, 9 parties de solution saline), une dilution 1/100 et éventuellement une dilution 1/1000.
Calcul de CFU à partir de Dilution bactérienne
Effectuer un dénombrement préliminaire de chaque boîte une fois que les bactéries ont eu le temps d'incuber, habituellement un ou deux jours. Vous voulez ne compter que les colonies individuelles, qui doivent être distinctes, des points isolés, et non pas un blob entier de différentes colonies cultivées ensemble. Choisissez la plaque qui a plus de 30 de ces colonies mais moins de 300.
Comptez le nombre de colonies individuelles. C'est le numéro CFU de votre dilution - vous devrez effectuer un calcul simple pour déterminer la CFU de l'échantillon original. Pour cet exemple, une plaque hypothétique contenant 46 colonies sera utilisée.
Déterminez la taille de la dilution que vous avez utilisée. Idéalement, vous étiez étiqueté les boîtes de Pétri à l'avance. Pour cet exemple, vous pouvez mélanger 1 mL de culture bactérienne avec 99 mL de solution saline. C'est une dilution au 1/100.
Multipliez le degré de dilution par la quantité que vous avez réellement étalée. Si, dans cet exemple, vous avez étalé 0,1 mL de votre dilution 1/100 sur l'agar, vous multipliez 0,1 x 1/100, pour un résultat de 1/1000 ou 0,001.
Divisez l'UFC de la dilution (le nombre de colonies que vous avez compté) par le résultat de l'étape 4. Pour cet exemple, vous divisez 46 par 1/1000, ce qui revient à multiplier par 1 000. Le résultat est de 46 000 UFC dans l'échantillon original.
