1. Tris(hydroxyméthyl)aminométhane (base Tris)
2. Eau déminéralisée
3. pH-mètre ou bandelettes indicatrices de pH
4. Bilan analytique
5. Fiole jaugée (50 mL)
Procédure:
1. Pesez 0,6057 gramme de base Tris à l’aide d’une balance analytique.
Ce calcul peut être effectué à l'aide de la formule :
Masse de Tris base (g) =Concentration (mM) x Volume de solution (L) x Poids moléculaire de Tris base (g/mol)
Dans ce cas:
Masse de Tris base (g) =20 mM x 0,050 L x 121,14 g/mol =0,6057 g
2. Transférez la base Tris pesée dans une fiole jaugée de 50 mL.
3. Ajoutez une petite quantité d'eau déminéralisée (environ 30 à 40 ml) pour dissoudre la base Tris.
4. Faites tourner doucement le flacon pour mélanger et dissoudre complètement la base Tris.
5. Vérifiez le pH de la solution à l'aide d'un pH-mètre ou de bandelettes indicatrices de pH. Le pH d’une solution de base Tris 20 mM doit être d’environ 8,0 à 8,5.
6. Si nécessaire, ajustez le pH de la solution en ajoutant de petites quantités d'acide chlorhydrique (HCl) ou d'hydroxyde de sodium (NaOH).
Remarque :la base Tris est une base faible, elle se dissoudra donc facilement dans l’eau. Cependant, si vous observez des particules non dissoutes, vous pouvez réchauffer doucement la solution pour les aider à se dissoudre.
6. Une fois le pH ajusté et la solution bien mélangée, ajoutez davantage d'eau déminéralisée pour porter le volume final à 50 ml.
7. Mélangez soigneusement en faisant tourner doucement le flacon.
Votre solution de base Tris 20 mM est maintenant prête à l’emploi. Conservez la solution à température ambiante ou réfrigérez-la si vous le souhaitez.
