Escherichia coli, E. coli, est une bactérie qui pousse dans les intestins inférieurs des mammifères. Cette bactérie a été découverte pour la première fois à la fin des années 1800. Depuis lors, il a une longue histoire d'utilisation dans la recherche scientifique. C'est l'organisme le plus largement utilisé en génétique moléculaire. Une partie de la raison pour laquelle E. coli est couramment utilisé dans la recherche scientifique, c'est qu'il est facile de grandir dans un laboratoire. Les facteurs qui facilitent la croissance d'E. Coli sont ses besoins nutritionnels simples, son taux de croissance rapide et ses besoins d'entretien modérés.
Stérilisez la boucle d'inoculation en la plaçant dans la flamme du bec Bunsen. Faites passer la moitié inférieure de la boucle dans la flamme jusqu'à ce qu'elle devienne rouge.
Laissez la boucle refroidir. Vous pouvez le toucher à la gélose stérile sur la plaque pour s'assurer qu'il a refroidi. Ne placez pas la boucle sur la table ou laissez-la entrer en contact avec autre chose que la gélose stérile ou la culture désirée maintenant qu'elle a été stérilisée.
Trempez la boucle dans la culture de E. coli et retirez-la. >
Ouvrez la plaque d'agar et glissez doucement la boucle d'avant en arrière sur la surface d'une section de l'agar. Prenez soin de ne pas rayer l'agar avec la boucle. L'agar fournit les nutriments dont E. coli a besoin pour se développer.
Placer à nouveau la boucle dans la flamme du bec Bunsen pour la stériliser. Une fois que la tige de la boucle se refroidit, touchez-la à une section stérile de la plaque pour vous assurer qu'elle est froide, puis glissez la boucle dans votre première strie pour faire une deuxième strie. Cette deuxième série est une version diluée de la première série. Répétez ce processus de stérilisation et de glissement jusqu'à ce que plusieurs sections de la plaque d'agar aient été glissées. La raison pour laquelle vous faites ceci est que vous pouvez choisir plus tard de simples colonies clonales. Cela aidera à s'assurer que vous avez au moins une section qui a des colonies individuelles - pas trop concentré (qui aura trop de croissance, et ne vous permet pas de choisir parmi une seule colonie) et pas trop dilué (ce qui ne donnerait pas de colonies) .
Stériliser la boucle dans la flamme une dernière fois avant de la mettre de côté dans la zone de travail.
Replacer la partie supérieure sur la plaque de gélose. Tournez la plaque à l'envers et placez-le dans l'incubateur réglé à 37 degrés Celsius (98,6 degrés Fahrenheit). Cette température d'incubation idéale simule la température du corps humain où réside E. coli. Dans les 24 à 48 heures, des colonies visibles de bactéries E. coli apparaîtront dans la plaque d'agar.
Avertissement
Un confinement adéquat des échantillons d'E. Coli et la stérilisation de la boucle d'inoculation réduiront chance de propager les bactéries. Aucune nourriture ou boisson ne doit être consommée dans la zone d'expérimentation. Le port de gants réduit davantage le risque de contamination des mains.
