Il l'a fait grâce à sa célèbre expérience à col de cygne. Voici l'essentiel:
* Broth de bœuf bouilli pasteur dans les flacons à col de cygne , qui avait un long cou incurvé qui permettait à l'air d'entrer mais empêchait la poussière et les micro-organismes d'atteindre le bouillon.
* Le bouillon est resté stérile pendant de longues périodes , même lorsqu'il est exposé à l'air.
* quand il a cassé le cou du ballon , exposant le bouillon directement à l'air, les micro-organismes ont grandi dans le bouillon en quelques jours.
Cette expérience a prouvé que les micro-organismes dans l'air, et non la génération spontanée, étaient responsables de la croissance des organismes dans le bouillon. Il a aidé à réfuter définitivement la théorie de la génération spontanée, qui avait été largement acceptée depuis des siècles.