1. Mesurer la croissance microbienne:
* turbidité: Les spectrophotomètres mesurent la turbidité (nébulosité) d'une culture liquide. Plus il y a de bactéries présents, plus la lumière est dispersée, conduisant à une lecture d'absorbance plus élevée. Cela permet une surveillance rapide et non invasive de la croissance bactérienne.
* Courbes de croissance: En prenant des lectures d'absorbance à intervalles réguliers, vous pouvez suivre la croissance des bactéries au fil du temps, en créant une courbe de croissance. Cela révèle des informations importantes sur le taux de croissance, la phase de retard, la phase exponentielle, la phase stationnaire et la phase de mort.
2. Quantification de la concentration microbienne:
* Courbes standard: La spectrophotométrie peut être utilisée pour créer des courbes standard, reliant les valeurs d'absorbance aux concentrations cellulaires connues. Cela vous permet de déterminer la concentration d'un échantillon inconnu en fonction de son absorbance.
* Comptage des cellules: Bien qu'il ne soit pas aussi précis que les méthodes de comptage des cellules directes, la spectrophotométrie fournit un moyen rapide et facile d'estimer le nombre de cellules dans un échantillon.
3. Analyser l'activité enzymatique:
* Dégradation du substrat: Certaines enzymes produisent un produit coloré lorsqu'ils décomposent leur substrat. En mesurant l'absorbance du produit, les spectrophotomètres vous permettent d'évaluer l'activité enzymatique.
* Études cinétiques: La spectrophotométrie aide à comprendre la cinétique des réactions enzymatiques, à mesurer les taux de réaction et à déterminer les paramètres enzymatiques comme KM et Vmax.
4. Étudier le métabolisme microbien:
* Produits métaboliques: Les spectrophotomètres peuvent mesurer l'absorbance de divers produits métaboliques, indiquant la présence et l'activité de voies métaboliques spécifiques.
* Utilisation des nutriments: En surveillant l'épuisement des nutriments spécifiques dans une culture, la spectrophotométrie aide à comprendre comment les microbes utilisent et métabolisent différents substrats.
5. Détection des composés spécifiques:
* Quantification ADN / ARN: Les spectrophotomètres peuvent mesurer l'absorbance des acides nucléiques à des longueurs d'onde spécifiques (260 nm), fournissant une estimation rapide de leur concentration.
* Quantitation des protéines: En utilisant les méthodes de Bradford, Lowry ou BCA, la concentration en protéines peut être déterminée en fonction du changement de couleur d'un réactif mesuré par spectrophotométrie.
Dans l'ensemble, un spectrophotomètre propose un outil polyvalent pour:
* Analyse quantitative: Mesurer avec précision la concentration de divers composés.
* Analyse qualitative: Détecter la présence ou l'absence de composés spécifiques.
* Surveillance et évaluation: Suivi des changements dans les populations microbiennes et les processus métaboliques.
En utilisant cet instrument, les microbiologistes acquièrent un aperçu de la croissance microbienne, du métabolisme, de l'activité enzymatique et de la présence de molécules spécifiques, facilitant une gamme d'applications de recherche et de diagnostic.
