1. Transport et reproduire l'ADN étranger:
* Origine de réplication (ORI): Les vecteurs possèdent une origine de séquence de réplication (ORI), leur permettant de se répliquer indépendamment dans la cellule hôte, assurant la multiplication du fragment d'ADN inséré.
* Site de clonage multiple (MCS): Le MCS est une région contenant une série de sites de reconnaissance des enzymes de restriction, où l'ADN étranger peut être inséré en utilisant des enzymes de restriction spécifiques.
2. Sélection et identification:
* marqueur sélectionnable: Les vecteurs intègrent des gènes marqueurs sélectionnables, comme les gènes de résistance aux antibiotiques. Cela permet la sélection de cellules qui ont réussi à prendre le vecteur, car elles survivront en présence de l'antibiotique.
* Gene reporter: Les gènes reporter, comme LACZ, permettent l'identification facile des cellules contenant le vecteur. Ils expriment une protéine détectable qui fournit un signal visuel.
3. Expression de l'ADN inséré:
* signaux de transcription et de traduction: Les vecteurs portent souvent des promoteurs et d'autres éléments de régulation qui assurent la transcription et la traduction du gène inséré dans la cellule hôte, permettant l'expression des protéines.
4. Types de vecteurs spécifiques:
* plasmides: Petites molécules d'ADN circulaires couramment utilisées dans le clonage. Ils sont facilement reproduits dans les bactéries.
* bactériophages: Des virus qui infectent les bactéries, qui peuvent être modifiées pour transporter de l'ADN étranger.
* Cosmids: Vectors hybrides combinant les caractéristiques des plasmides et des bactériophages, offrant une capacité de clonage élevée.
* Chromosomes artificiels de levure (YACS): Les chromosomes artificiels utilisés pour cloner de grands fragments d'ADN, généralement trouvés chez les eucaryotes.
en résumé:
Les vecteurs de clonage sont essentiels pour le clonage et la manipulation des gènes, fournissant les outils essentiels pour:
* transport et reproduisant l'ADN étranger.
* Sélection et identification des cellules contenant le vecteur.
* permettant l'expression de l'ADN inséré.
* Choisir le type de vecteur approprié pour l'application souhaitée.
Ils sont cruciaux pour la recherche, la biotechnologie et diverses applications, notamment la thérapie génique, la production de protéines et le génie génétique.
