L'électrophorèse limite libre ou mobile est un type de technique d'électrophorèse qui repose sur le mouvement d'une frontière tranchante entre une solution contenant l'analyte (la substance d'intérêt) et une solution de tampon . Cette technique a été développée par arne tiselius Dans les années 1930 et lui a valu le prix Nobel de chimie en 1948 .
Voici comment cela fonctionne:
1. Préparation: Une solution contenant l'analyte est superposée sur une solution tampon dans un tube en verre vertical. Les deux solutions ont des indices de réfraction différents, créant une frontière visible.
2. électrophorèse: Un champ électrique est appliqué à travers le tube. Les molécules d'analyte chargées migrent vers l'électrode avec la charge inverse.
3. Migration: Les molécules d'analyte se déplacent à travers la solution tampon, créant une limite mobile qui peut être observé en utilisant Schlieren Optics . Cette technique utilise une réfraction légère pour visualiser la frontière et mesurer son mouvement.
4. Analyse: Le taux de migration de la frontière est proportionnelle à la mobilité électrophorétique de l'analyte , qui est déterminé par sa charge et sa taille. Ces informations peuvent être utilisées pour identifier et quantifier différents composants dans le mélange d'analyte.
Caractéristiques clés de l'électrophorèse limite libre ou mobile:
* pas de support: L'analyte migre à travers un tampon liquide, contrairement à d'autres techniques d'électrophorèse qui utilisent des gels ou des membranes.
* limite tranchante: La présence d'une frontière distincte permet une mesure précise de la migration de l'analyte.
* Analyse quantitative: La technique convient à l'analyse quantitative de différents composants dans un mélange.
* Résolution limitée: Par rapport aux autres techniques d'électrophorèse, l'électrophorèse des limites mobiles a une résolution limitée pour séparer les mélanges complexes.
Applications:
* Caractérisation des protéines: Déterminer la pureté et l'homogénéité des solutions protéiques.
* Focus isoélectrique: Identification du point isoélectrique des protéines.
* Analyse des protéines sériques: Étudier la composition des protéines sériques dans les applications cliniques.
Limitations:
* Résolution limitée: Par rapport à d'autres techniques, il a une puissance de résolution plus faible pour les mélanges complexes.
* Défis techniques: Nécessite un équipement spécialisé et des conditions expérimentales précises.
* en temps chronométrant: Le processus peut prendre relativement de temps.
Techniques modernes:
Alors que l'électrophorèse limite libre ou mobile a été une percée importante à son époque, il a été largement remplacé par des techniques d'électrophorèse plus sophistiquées et polyvalentes, telles que électrophorèse sur gel et électrophorèse capillaire . Ces techniques offrent une résolution plus élevée, un fonctionnement plus simple et une applicabilité plus large.
Cependant, la signification historique de l'électrophorèse limite libre ou mobile reste en ouvrant la voie au développement de techniques d'électrophorèse moderne qui sont largement utilisées dans divers domaines aujourd'hui.
