Voici une ventilation:
qu'est-ce que c'est?
* Les adaptateurs sont de petites séquences d'ADN spécialement conçues avec extrémités collantes , qui sont des surplombs courts et à brin qui peuvent se lier à des séquences complémentaires.
* Ils sont généralement de 10 à 20 paires de bases.
Quel est leur objectif?
1. Rejoindre des fragments d'ADN avec des fins incompatibles:
* Parfois, les fragments d'ADN que vous souhaitez rejoindre ont différents sites de coupe enzymatique de restriction, ce qui entraîne des extrémités incompatibles.
* Les adaptateurs peuvent être ligaturés aux extrémités de ces fragments, fournissant des extrémités collantes compatibles qui peuvent ensuite être rejoises par l'ADN ligase.
2. Création de sites d'enzyme de restriction spécifiques:
* Vous pourriez avoir besoin d'un site enzymatique de restriction spécifique pour le clonage ou d'autres manipulations.
* Les adaptateurs peuvent être conçus pour inclure ces sites, vous permettant de créer le site de restriction souhaité sur le fragment d'ADN.
3. Ajout de nouvelles séquences:
* Les adaptateurs peuvent transporter des séquences spécifiques comme les promoteurs, les codons de démarrage ou d'autres éléments réglementaires.
* Ceux-ci peuvent être ajoutés au fragment d'ADN en ligaturant l'adaptateur.
comment cela fonctionne:
1. Digestion des restrictions: Le fragment d'intérêt ADN est digéré avec une enzyme de restriction pour créer des extrémités collantes.
2. Ligation de l'adaptateur: L'adaptateur est ligaturé aux extrémités digérées du fragment d'ADN, en utilisant l'ADN ligase.
3. Rejoindre d'autres fragments: Le fragment modifié par l'adaptateur peut ensuite être joint à d'autres fragments, soit par ligature, soit par d'autres méthodes, pour créer une molécule d'ADN plus grande.
Exemple:
* Imaginez que vous voulez insérer un gène dans un plasmide.
* Le gène a été coupé avec enzyme A, créant des extrémités collantes.
* Le plasmide a été coupé avec enzyme B, créant différentes extrémités collantes.
* Vous pouvez utiliser un adaptateur avec des extrémités collantes compatibles avec l'enzyme A et l'enzyme B pour rejoindre le gène et le plasmide.
en résumé:
Les adaptateurs sont des outils polyvalents dans la technologie d'ADN recombinant qui facilitent la jonction des fragments d'ADN, la création de sites enzymatiques de restriction spécifiques et l'ajout de nouvelles séquences aux molécules d'ADN. Ils jouent un rôle crucial dans la manipulation de l'ADN pour diverses applications, notamment le clonage des gènes, la thérapie génique et le diagnostic.
