Que sont les cosmids?
Les cosmides sont des vecteurs hybrides qui combinent les caractéristiques des plasmides et des bactériophages. Ce sont essentiellement des plasmides portant une séquence d'ADN spécifique appelée site "cos", qui est dérivé du phage lambda.
Caractéristiques clés:
* Capacité de clonage grande: Les cosmides peuvent accueillir des inserts d'ADN de 35 à 45 Ko, nettement plus importants que la capacité de la plupart des plasmides (généralement 10-15 Ko). Cela permet le clonage de gènes plus grands ou de génomes entiers.
* Emballage efficace: Le site "COS" permet l'emballage de l'ADN Cosmid en particules de phage lambda. Ce processus utilise la machinerie d'emballage du phage, permettant une livraison efficace de l'ADN recombinant dans les cellules bactériennes.
* marqueurs sélectionnables: Les cosmides portent des marqueurs sélectionnables, comme les gènes de résistance aux antibiotiques, permettant l'identification de cellules bactériennes contenant le cosmide recombinant.
comment les cosmids fonctionnent dans la technologie d'ADN recombinant:
1. Insertion des fragments d'ADN: Le fragment d'ADN à cloner est inséré dans le vecteur Cosmid à un site de restriction spécifique.
2. Emballage: Le cosmide recombinant est emballé dans des particules de phage lambda à l'aide d'un extrait d'emballage in vitro spécialisé.
3. Infection: Les particules de phage emballées infectent les cellules bactériennes, fournissant le cosmide recombinant.
4. Réplication et sélection: Le Cosmid se réplique dans la cellule bactérienne et le marqueur sélectionnable permet la sélection de bactéries portant le cosmide recombinant.
5. Récupération de l'ADN cloné: L'ADN cloné peut être récupéré à partir des cellules bactériennes pour une analyse ou des applications plus approfondies.
Applications:
* Mappage et séquençage du génome: Les cosmides ont été largement utilisés dans les projets de cartographie du génome et de séquençage en raison de leur capacité à cloner de grands fragments d'ADN.
* bibliothèques de gènes: Ils sont utilisés pour créer des bibliothèques génomiques contenant de grands fragments d'ADN, représentant l'ensemble du génome d'un organisme.
* génomique fonctionnelle: Les cosmides peuvent être utilisés pour étudier la fonction des grands gènes ou des grappes de gènes.
Avantages des cosmides:
* Capacité de clonage élevée: Permet le clonage de grands fragments d'ADN.
* Emballage et livraison efficaces: Le système d'emballage de phage Lambda assure une livraison efficace dans les cellules bactériennes.
* marqueurs sélectionnables: Faciliter l'identification des bactéries contenant le cosmide recombinant.
Limitations:
* grande taille: Ils sont plus grands que les plasmides, ce qui peut être un inconvénient pour certaines procédures de clonage.
* Instabilité potentielle: Les inserts importants peuvent parfois provoquer une instabilité dans le cosmide.
En résumé, les cosmides sont des outils puissants dans la technologie d'ADN recombinant, permettant le clonage et la manipulation de grands fragments d'ADN, ce qui les rend essentiels à diverses applications dans la recherche génomique, la thérapie génique et la biotechnologie.
