Guide étape par étape d'utilisation d'un spectrophotomètre :de l'échauffement à la collecte de données
Un spectrophotomètre mesure l'absorption de la lumière à des longueurs d'onde spécifiques, combinant un spectromètre (source de lumière) et un photomètre (détecteur). En appliquant la loi de Beer, il calcule la concentration de solutions colorées en fonction de l'absorbance.
Spectrophotomètre Flinn
- Connectez l'appareil et allumez-le. Prévoyez 5 à 10 minutes pour l'échauffement.
- Localisez le bouton de longueur d'onde à côté du compartiment à échantillons et définissez la longueur d'onde souhaitée.
- Utilisez la roue à filtres pour sélectionner le filtre approprié :violet (300 à 375 nm), bleu (375 à 520 nm), jaune (520 à 740 nm) ou rouge (740 à 900 nm+).
- Appuyez sur le bouton Mode pour afficher simultanément le pourcentage de transmission et d'absorbance.
- Ouvrez la chambre d'échantillon, fermez-la et réglez le cadran avant gauche sur une transmission de 0 %.
- Portez des gants, essuyez une cuvette avec une lingette de laboratoire et remplissez-la aux trois quarts de solvant.
- Insérez la cuvette dans la chambre, fermez la porte et réglez la molette avant droite sur une transmission de 100 %.
- Remplacez la cuvette de solvant par une cuvette d'échantillon, fermez la chambre et enregistrez la lecture.
Spectrophotomètre 20/20D
- Branchez et allumez l'instrument ; prévoyez un échauffement de 15 minutes.
- Ajustez le bouton de longueur d'onde à côté du compartiment à échantillons.
- Assurez-vous que le compartiment à échantillons est vide et fermé.
- Réglez le bouton de contrôle du zéro (avant gauche) sur 0 %.
- Portez des gants et essuyez une cuvette vierge avec une lingette de laboratoire.
- Insérez la cuvette, fermez la porte et réglez le bouton de commande de la lumière (avant droit) sur 100 %.
- Retirez la cuvette vierge, insérez une cuvette d'échantillon et enregistrez la valeur affichée.
Formateur en spectrophotomètre
- Connectez et allumez l'appareil ; prévoyez 15 minutes pour l'échauffement.
- Appuyez sur le sélecteur Pourcentage T/A pour choisir le mode Pourcentage de transmission ou Absorbance.
- Réglez le cadran de longueur d'onde à côté de la chambre d'échantillon sur la longueur d'onde souhaitée.
- Portez des gants, essuyez une cuvette et insérez une cuvette remplie de solvant dans la chambre.
- Ajustez la molette avant droite sur 100 % (mode transmission) ou 0 % (mode absorption).
- Remplacez la cuvette de solvant par une cuvette d'échantillon et enregistrez la valeur.
Spectronique 401
- Assurez-vous que la chambre d'échantillonnage et les portes d'accès sont fermées et vides.
- Appuyez sur le bouton d'alimentation à l'arrière ; attendez 10 minutes pour l'échauffement.
- Saisissez la longueur d'onde souhaitée sur le clavier et appuyez sur "Aller à".
- Essuyez une cuvette de solution vierge avec une lingette de laboratoire, insérez-la face vers l'avant et appuyez sur le bouton « zéro automatique ».
- Remplacez la cuvette vierge par une cuvette d'échantillon nettoyée et enregistrez l'absorbance affichée à l'écran.
Le respect de ces étapes standardisées garantit des résultats précis et reproductibles et minimise les erreurs de l'utilisateur.