Comprendre les bases

* Tris-HCl : Il s'agit d'une solution tampon obtenue en combinant du Tris (tris(hydroxyméthyl)aminométhane) avec de l'acide chlorhydrique (HCl).

* 10 mM : Cela représente 10 millimolaires, indiquant la concentration de la solution. Cela signifie qu'il y a 10 millimoles de Tris-HCl par litre de solution.

Matériaux

* Base Tris (base libre) : Vous aurez besoin d’une quantité spécifique de poudre de base Tris.

* Acide chlorhydrique (HCl) : Vous aurez besoin d'une solution concentrée de HCl (généralement 1 M ou 12 M).

* Eau désionisée : Utilisez de l’eau déminéralisée de haute qualité pour plus de précision.

* Cylindre gradué : Pour mesurer les volumes avec précision.

* Balance : Pour peser avec précision la poudre de base Tris.

* pH-mètre (facultatif) : Pour un ajustement précis du pH.

Calculs

1. Poids moléculaire de la base Tris : Le poids moléculaire de la base Tris est de 121,14 g/mol.

2. Calculez la masse de base Tris nécessaire : Vous utiliserez la formule suivante pour calculer la masse de la base Tris :

* Masse (g) =(Concentration (mM) × Poids moléculaire (g/mol) × Volume (L)) / 1000

*Pour une solution 10 mM dans 1 litre (1000 ml) :

* Masse =(10 mM × 121,14 g/mol × 1 L) / 1000

* Masse =1,2114 g

Procédure

1. Pesez la base Tris : Pesez soigneusement la quantité calculée de base Tris (1,2114 g pour 1 litre).

2. Dissoudre la base Tris dans l'eau : Ajouter la base Tris à environ 800 ml d'eau déminéralisée dans un récipient adapté. Remuer jusqu'à ce que la poudre se dissolve complètement.

3. Ajustez le pH :

* À l'aide d'un pH-mètre : Ajoutez goutte à goutte du HCl concentré à la solution Tris tout en surveillant constamment le pH avec un pH-mètre. Ajustez le pH à la valeur souhaitée (généralement autour de 7,5 à 8,5 pour les tampons Tris-HCl).

* Sans pH-mètre : Ajouter environ 0,5 ml de HCl concentré (pour une solution de 1 L). Remuez la solution et vérifiez le pH à l’aide de papier pH. Ajustez le volume de HCl en conséquence jusqu'à ce que le pH souhaité soit atteint.

4. Amenez la solution au volume final : Après avoir ajusté le pH, ajoutez de l'eau déminéralisée pour porter le volume total de la solution à 1 litre.

5. Stérilisation : Stériliser la solution si nécessaire par autoclavage.

Remarques importantes

* Ajustement du pH : La quantité exacte de HCl nécessaire pour atteindre le pH souhaité variera légèrement en fonction de la pureté de la base Tris et de la concentration de la solution de HCl.

* Précision : Utilisez des balances précises et des éprouvettes graduées pour garantir une préparation précise.

* Stockage : Conservez la solution Tris-HCl à température ambiante ou au réfrigérateur.

* Durée de conservation : Les solutions de Tris-HCl ont généralement une bonne durée de conservation, mais il est toujours préférable de vérifier tout signe de dégradation (par exemple décoloration, trouble).

Faites-moi savoir si vous avez des questions ou si vous souhaitez préparer une concentration ou un volume différent de solution Tris-HCl. Heureux de vous aider !