Pour préparer *V* mL d'un tampon phosphate avec *C"M de NaH2PO4 et *D*M de Na2HPO4 qui produit un pH de 5,8, vous aurez besoin des éléments suivants :
$$ [H^+] =10^{−5,8} =1,58 × 10^{−6} M$$
Où [H+] est la concentration souhaitée en ions hydrogène.
Nous pouvons utiliser l’équation de Henderson-Hasselbalch pour calculer le rapport NaH2PO4/Na2HPO4 requis pour atteindre ce pH :
$$pH =pKa + log \left ( \frac{[A^-]}{[HA]} \right )$$
Où:
* *Ka* est la constante de dissociation acide de H2PO4- (l'acide conjugué de NaH2PO4)
* [A-] est la concentration de Na2HPO4 (la base conjuguée de NaH2PO4)
* [HA] est la concentration de NaH2PO4 (la forme acide)
Le *Ka* de H2PO4- à 25°C est *2,2 *10-7*. Par conséquent, en remplaçant les valeurs données dans l’équation de Henderson-Hasselbalch, nous obtenons :
$$5,8 =7,2 + log \left ( \frac{[Na2HPO4]}{[NaH2PO4]} \right )$$
En résolvant [Na2HPO4] / [NaH2PO4], nous obtenons :
$$\frac {[Na2HPO4]}{[NaH2PO4]} =0,398$$
Par conséquent, le rapport de [NaH2PO4] à [Na2HPO4] doit être de 1 : 0,398 afin d’obtenir un pH de 5,8.
Étape 2 : Préparer les solutions NaH2PO4 et Na2HPO4
- Peser la quantité requise de NaH2PO4 (0,2 M) et de Na2HPO4 (0,1 M) à l'aide d'une balance analytique.
- Dissoudre chaque composé dans l'eau Milli-Q dans des récipients séparés.
- Compléter le volume de chaque solution à 500 mL avec de l'eau Milli-Q.
*Étape 3 : Mélanger les solutions NaH2PO4 et Na2HPO4
- Mélanger les deux solutions dans le rapport approprié (dans ce cas, 1 volume de solution 0,2 M NaH2PO4 pour 0,398 volume de solution 0,1 M Na2HPO4).
- Ajouter de l'eau DI pour amener le volume total à 1 litre.
- Vérifier le pH du tampon à l'aide d'un pH-mètre. Si nécessaire, ajustez le pH en ajoutant de petites quantités de solution de NaH2PO4 0,2 M ou de Na2HPO4 0,1 M.
