Séparation et identification des composés :
En CCM, une petite quantité de l'échantillon est appliquée sur une phase stationnaire, qui est généralement un support solide comme du gel de silice ou de l'alumine déposé sur une plaque de verre ou de plastique. La phase mobile, généralement un solvant ou un mélange de solvants, peut se déplacer à travers la phase stationnaire par action capillaire ou en appliquant une force externe.
À mesure que la phase mobile traverse la phase stationnaire, les composants de l'échantillon se déplacent à des vitesses différentes en fonction de leur polarité, de leur solubilité et de leur affinité pour les deux phases. Les composés plus polaires interagissent plus fortement avec la phase stationnaire et se déplacent plus lentement, tandis que les composés moins polaires se déplacent plus rapidement. En sélectionnant soigneusement la combinaison de phase mobile et de phase stationnaire, la séparation des différents composés dans un mélange peut être obtenue.
Visualisation des composés :
Après la séparation, la plaque CCM est généralement visualisée sous une lumière ultraviolette (UV) ou par coloration chimique. De nombreux composés absorbent la lumière UV et leur présence peut être détectée sous forme de points sombres ou de bandes sur la plaque CCM. Les taches chimiques, comme l'iode ou la ninhydrine, peuvent réagir spécifiquement avec certains groupes fonctionnels, rendant les composés visibles sur la plaque.
Identification :
La position d'un composé sur la plaque CCM, connue sous le nom de valeur du facteur de rétention (Rf), est caractéristique de ce composé. En comparant les valeurs Rf des étalons connus avec celles de l'échantillon, l'identité des composés présents dans le mélange peut être déterminée.
Évaluation de la pureté :
La CCM peut également fournir des informations sur la pureté des composés. Si un composé est pur, il apparaîtra sous la forme d’un seul point ou d’une seule bande sur la plaque CCM. La présence de taches ou de bandes supplémentaires indique la présence d'impuretés. L'intensité relative des taches peut donner une estimation des quantités relatives des différents composants du mélange.
Analyse quantitative :
Bien que la CCM soit avant tout une technique qualitative, elle peut également être utilisée pour une analyse semi-quantitative. En mesurant la surface ou l'intensité des taches, les concentrations relatives de différents composés dans un mélange peuvent être estimées.
En résumé, la CCM constitue un outil précieux pour la séparation, l’identification et l’évaluation de la pureté des composés. Il s’agit d’une technique polyvalente largement utilisée dans divers domaines, notamment la chimie organique, la biochimie, les sciences pharmaceutiques et la médecine légale. Malgré l’émergence de techniques analytiques plus avancées, la CCM reste une méthode simple, rentable et accessible à de nombreuses fins analytiques.
