Voici comment cela fonctionne:

* Enzymes de restriction: Ces enzymes sont utilisées pour couper à la fois l'ADN plasmidique et le gène d'intérêt à des séquences spécifiques, créant des extrémités collantes (surplombs complémentaires).

* enzyme ligase: Cette enzyme agit comme une «colle moléculaire» et rejoint les extrémités collantes du gène et du plasmide ensemble, formant un plasmide recombinant.

La ligase la plus courante utilisée en biologie moléculaire est T4 ADN ligase .