1. Fixation:
* Il s'agit de la première étape la plus critique.
* Le but est de préserver la structure des tissus et d'éviter la décomposition.
* Les fixatifs courants comprennent le formol, le glutaraldéhyde et l'alcool.
2. Déshydratation:
* L'eau est retirée du tissu à l'aide d'une série graduée de solutions d'alcool (généralement 70%, 90%, 95% et 100%).
* Cela prépare le tissu pour l'incorporer dans de la cire de paraffine.
3. Effacement:
* L'alcool est retiré du tissu et remplacé par un solvant qui est miscible avec de l'alcool et de la cire de paraffine (par exemple, du xylène, du toluène ou de l'histocléar).
4. Incorporer:
* Le tissu est infiltré avec de la cire de paraffine fondue sous vide.
* Ce processus permet à la cire de pénétrer le tissu et de se solidifier, créant un bloc ferme qui peut être sectionné.
5. Section:
* Le bloc de paraffine est coupé et tranché en sections minces (généralement 4 à 10 micromètres d'épaisseur) à l'aide d'un microtome.
6. Montage:
* Les sections sont soigneusement montées sur des lames de verre, généralement avec un adhésif soluble dans l'eau.
7. Déparaffinisation:
* La cire de paraffine est retirée des coupes de tissus à l'aide d'une série de solvants (par exemple, xylène, toluène).
8. Réhydratation:
* Les coupes de tissus sont réhydratées par une série graduée de solutions d'alcool (par exemple, 100%, 95%, 90%, 70% et l'eau).
9. Talage:
* C'est là que les composants tissulaires sont visualisés.
* Il existe de nombreuses taches, chacune avec ses propres propriétés et applications.
* Les exemples incluent l'hématoxyline et l'éosine (H&E) pour la morphologie générale, et des taches spéciales pour des types ou des structures de cellules spécifiques.
10. Montage:
* Les sections colorées sont montées avec une lamelle et un milieu de montage (par exemple, DPX, Permount).
11. Étiquetage:
* Les lames sont étiquetées avec des informations pertinentes (nom du patient, date, type de tissu, tache).
Remarque: Il s'agit d'un protocole standard. Il peut y avoir des variations en fonction du type de tissu spécifique, des techniques de coloration et des applications de recherche.
