Voici comment cela fonctionne:
1. Préparation de l'échantillon de sang: L'échantillon de sang est généralement traité avec un tampon de lyse pour ouvrir les cellules et libérer leur contenu, y compris l'ADN.
2. Centrifugation: L'échantillon LYSED est ensuite centrifugé à grande vitesse, créant un gradient de densité.
3. Gradient de saccharose: Une solution de saccharose est superposée au-dessus de l'échantillon lysé. Cette solution a un gradient d'augmentation de la concentration de saccharose, créant un gradient de densité croissante.
4. Séparation: Pendant la centrifugation, différentes composantes cellulaires migreront vers des positions dans le gradient où leur densité correspond à la concentration de saccharose environnante. L'ADN, relativement dense, s'installera à une couche spécifique dans le gradient.
5. Collection: La couche contenant l'ADN est ensuite collectée et purifiée davantage pour éliminer les contaminants restants.
Par conséquent, le saccharose n'est pas directement impliqué dans la dégradation des cellules ou l'isolement de l'ADN lui-même. Au lieu de cela, il agit comme un milieu de gradient de densité Pour faciliter la séparation de l'ADN des autres composants cellulaires.
Remarque importante: Bien que le saccharose soit utilisé dans certains protocoles d'isolement d'ADN, d'autres méthodes peuvent utiliser différents milieux de gradient de densité comme le chlorure de césium (CSCL).