Par contributeur
Mis à jour le 30 août 2022
La maîtrise de l’art de la dilution est essentielle pour toute personne travaillant en chimie ou en microbiologie. Des dilutions précises améliorent la précision du laboratoire, réduisent la variabilité et conduisent finalement à des données plus fiables. Le guide étape par étape suivant s'appuie sur les meilleures pratiques et normes de sécurité des laboratoires, garantissant que vous effectuez chaque dilution avec confiance et précision.
Pour les dilutions chimiques ou analytiques, utilisez de la verrerie volumétrique telle qu'une pipette jaugée et une fiole jaugée. En microbiologie, les pipettes sérologiques et les éprouvettes graduées sont appropriées pour transférer de petits volumes tout en gardant la solution dénombrable.
Commencez par une solution mère liquide :soit un échantillon liquide pur, soit une solution préparée à partir d'une poudre ou d'un liquide dilué à une concentration connue.
Mesurez le volume exact de bouillon à l'aide d'une pipette jaugée et transférez-le dans une fiole jaugée contenant le volume final souhaité. Pour une dilution au 1:100, pipetez 1,0 ml de bouillon dans un flacon de 100 ml et ajoutez 99 ml de diluant pour atteindre un total de 100 ml.
Transvaser la solution mère à l'aide d'une pipette sérologique dans un bécher, puis ajouter le diluant à l'aide d'une éprouvette graduée. Pour une dilution au 1:100, ajoutez 1 ml de solution mère à 100 ml de diluant, ce qui donne un volume final de 101 ml.
Utilisez le diluant spécifié pour votre méthode. En microbiologie, les choix courants incluent les milieux, les tampons et l’eau stérile. En chimie, les diluants peuvent être des solvants, des acides, des bases ou de l'eau déminéralisée, selon l'analyte.
Faites tourner le flacon à mi-chemin de l'ajout de diluant pour garantir l'homogénéité, puis continuez à ajouter jusqu'à ce que le volume final soit atteint.
Pour les derniers millilitres, utilisez un compte-gouttes pour ajouter le diluant en gouttes simples, en vous assurant que le volume final est mesuré avec précision.
Tenez le flacon ou le bécher au niveau des yeux et lisez le bord inférieur du ménisque, la courbe concave formée par la surface du liquide. Alignez ce point avec l'échelle sur le récipient pour une mesure précise.
Insérez un barreau d'agitation magnétique dans la dilution et placez le récipient sur une plaque d'agitation ou, si aucune plaque d'agitation n'est disponible, arrêtez le flacon, agitez-le et retournez-le à plusieurs reprises pour mélanger.
Lorsqu’un volume final important est requis, effectuez des dilutions en série. Pour une dilution au 1:10 000, effectuez d’abord une dilution au 1:100 (1 ml de solution dans 100 ml de diluant). Transférez ensuite 1 ml de cette solution intermédiaire dans 100 ml supplémentaires de diluant. L'effet cumulatif donne une dilution de 1:10 000.
Ajoutez toujours de l'acide à l'eau, et non l'inverse, pour éviter les réactions exothermiques. Commencez par ajouter un petit volume d'eau dans le ballon avant d'introduire l'acide, puis diluez au volume requis.
Étiquetez clairement les dilutions, évitez de remplacer le liquide perdu lors du mélange et ajoutez toujours de l'acide à l'eau pour garantir la sécurité et la précision.
L'ajout d'eau à l'acide peut produire des réactions violentes et des blessures graves. Utilisez une poire à pipette, jamais une pipette à bouche et ajoutez toujours de l'acide à l'eau.