Comprendre la nécessité d'un blanc / référence
Dans la spectroscopie (UV-vis, IR, etc.) ou la chromatographie, un blanc ou une référence est crucial car:
* Il corrige l'absorbance / interférence de fond: Le solvant lui-même, la cuvette ou d'autres composants du système peuvent absorber la lumière à certaines longueurs d'onde. Un blanc aide à éliminer ces signaux de votre mesure, isolant le signal en raison de votre analyte.
* il définit une ligne de base: Une référence établit un point de départ pour la comparaison, vous permettant de mesurer avec précision les changements d'absorbance ou d'intensité du signal.
Choisir le blanc / référence pour 80% d'acétone / eau
* blanc idéal: Le blanc idéal est une solution contenant * tout sauf l'analyte * dans le même système de concentration et de solvant que votre échantillon. Dans ce cas, le blanc serait à 80% d'acétone dans l'eau.
Pourquoi pas de l'eau pure?
* Absorption d'acétone: L'acétone a une absorbance significative dans la région UV-Vis. L'utilisation de l'eau pure comme blanc entraînerait une biaisation de vos mesures parce que l'acétone de votre échantillon contribuerait à la lecture d'absorbance, même si ce n'est pas l'analyte.
Comment préparer le blanc:
1. Utilisez le même solvant: Préparez votre blanc en utilisant le même mélange à 80% d'acétone / eau que vous utilisez pour vos échantillons.
2. Assurer la cohérence: Assurez-vous que le blanc est le même volume et la même température que vos échantillons pour minimiser les erreurs.
3. Exécutez d'abord le blanc: Avant de mesurer vos échantillons, passez le blanc à travers l'instrument pour le "zéro". Cela définit la ligne de base.
Considérations supplémentaires:
* Interférences des autres composants: Si votre échantillon contient des composants en plus de l'analyte qui absorbe à la même longueur d'onde, vous pourriez avoir besoin d'une approche plus sophistiquée comme une méthode d'addition standard pour corriger ces interférences.
* Variations instrumentales: L'instrument spécifique que vous utilisez peut avoir ses propres lignes directrices pour la préparation et l'utilisation en blanc. Reportez-vous toujours au manuel du fabricant pour les meilleures pratiques.
Exemple: Si vous analysez une solution d'un colorant dans 80% d'acétone / eau, votre blanc serait à 80% d'acétone / eau * sans * le colorant. Cela vous permet d'isoler le signal d'absorbance du colorant seul.
