Comprendre les bases
* tampon de phosphate de sodium: Ce tampon est généralement fabriqué en utilisant un mélange de phosphate de sodium monobasique (NAH2PO4) et de phosphate de sodium dibasique (Na2HPO4). Ces deux composants agissent comme une paire acide-base conjuguée, permettant à la solution de résister aux changements de pH.
* pH 6,9: Le pH souhaité de votre tampon. Cela déterminera le rapport de NAH2PO4 à Na2HPO4 nécessaire.
* 0,006 m NaCl: Il s'agit simplement d'une solution saline ajoutée au tampon. Il n'influence pas directement le pH du tampon mais peut être utilisé pour des besoins expérimentaux spécifiques.
étapes pour préparer le tampon
1. Calculez les masses requises:
* Déterminez le PKA: La PKA pertinente pour le tampon de phosphate est de 7,21 (le PKA de l'équilibre H2PO4- / HPO42-). C'est proche du pH souhaité, ce qui en fait un bon choix.
* Utilisez l'équation de Henderson-Hasselbalch:
* Ph =PKA + log ([HPO42-] / [H2PO4-])
* 6.9 =7.21 + log ([HPO42-] / [H2PO4-])
* Résoudre pour le rapport:[HPO42-] / [H2PO4-] =0,50
* Calculez la molarité de chaque composant phosphate:
* Mollarité totale du phosphate =0,02 m
* [NA2HPO4] =0,02 m * (0,50 / 1,50) =0,0067 m (environ)
* [NAH2PO4] =0,02 m * (1,00 / 1,50) =0,0133 m (environ)
* Convertir les molarités en grammes:
* Vous aurez besoin des poids moléculaires de NAH2PO4 (119,98 g / mol) et Na2HPO4 (141,96 g / mol).
* Calculez la masse nécessaire pour chaque composant en utilisant la formule suivante:masse =(molarité * volume * poids moléculaire) / 1000
* Par exemple, pour NAH2PO4, si vous voulez faire 1 L de tampon:
* Masse =(0,0133 mol / l * 1 l * 119,98 g / mol) / 1000 =1,59 g
* Calculez la masse de Na2HPO4 de la même manière.
2. dissoudre les sels dans l'eau:
* Pesez les quantités calculées de NAH2PO4 et NA2HPO4.
* Les dissoudre dans environ 800 ml d'eau distillée.
* Ajouter la masse calculée de NaCl à la solution et remuer pour se dissoudre.
* Utilisez un agitateur magnétique ou remuez la barre pour assurer un mélange approfondi.
3. ajustez le pH (facultatif):
* Utilisez un pH-mètre pour vérifier le pH de la solution.
* Si le pH n'est pas exactement 6,9, vous pouvez le régler légèrement en ajoutant de petites quantités de HCl 1 M (pour abaisser le pH) ou 1 M NaOH (pour augmenter le pH). Ajoutez ces solutions dropwise tout en surveillant le pH avec un compteur.
4. apporter la solution au volume final:
* Une fois le pH ajusté, ajoutez soigneusement de l'eau distillée pour apporter le volume total de la solution à 1 L.
5. Vérifiez et stockez:
* Vérifiez le pH une fois de plus pour vous assurer qu'il est correct.
* Conservez votre tampon à température ambiante ou dans un réfrigérateur pour un stockage plus long.
Considérations importantes
* Qualité de l'eau: Utilisez de l'eau distillée de haute qualité pour les meilleurs résultats.
* Précision: Pesez précisément les sels pour assurer la bonne concentration de tampon.
* Calibration du mètre pH: Calibrez correctement votre pH-mètre avant utilisation pour des mesures précises.
* Sécurité: Portez toujours un équipement de sécurité approprié (gants, lunettes) lors de la manipulation des produits chimiques.
Cette procédure devrait vous donner une solution tampon de phosphate de sodium 0,02 M à pH 6,9 avec 0,006 M NaCl. N'oubliez pas d'ajuster les volumes et les calculs si vous avez besoin de fabriquer un volume de tampon différent.
