1. Suivi du colorant:
* Ce composant vous permet de suivre visuellement la progression de l'électrophorèse.
* C'est un colorant coloré qui migre à travers le gel à un rythme prévisible.
* Les exemples courants comprennent:
* Bromophénol Bleu: Migre à une vitesse similaire à un fragment de 300 à 400 pb d'ADN.
* xylène cyanol ff: Migre à une vitesse similaire à un fragment de 4 à 6 kb d'ADN.
2. Glycérol / saccharose:
* Ce composant rend l'échantillon plus dense que la solution tampon, donc il s'enfonce dans le puits et ne diffuse pas.
* Cela garantit que l'échantillon est chargé correctement et reste concentré au bas du puits.
3. Tampons:
* Ces composants aident à maintenir le pH de l'échantillon et de la solution tampon pendant l'électrophorèse.
* Ils garantissent la fonction appropriée des enzymes impliquées dans le processus.
* Les exemples incluent Tris-Borate-EDTA (TBE) ou les tampons Tris-Acétate-EDTA (TAE).
4. Autres additifs (facultatif):
* SDS (dodécyl sulfate de sodium): Ce détergent est souvent ajouté aux échantillons de protéines pour les dénaturer et les enrober d'une charge négative, leur permettant de migrer en fonction de leur taille.
* Réduction des agents: Comme le dithiothréitol (DTT) ou le β-mercaptoéthanol, sont parfois ajoutés pour briser les liaisons disulfure au sein des protéines, les dénaturant davantage.
points clés à retenir:
* La composition spécifique du colorant de chargement peut varier en fonction du type d'électrophorèse effectuée (ADN, ARN ou protéine).
* Le choix du colorant de suivi doit être approprié pour la plage de taille des molécules analysées.
* Le colorant de chargement doit être utilisé avec parcimonie pour éviter d'introduire trop de volume dans les puits, ce qui peut affecter la résolution de la bande.
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