Matériaux :
- Eau distillée
- Phosphate monosodique (NaH2PO4)
- Hydrogénophosphate de sodium (Na2HPO4)
- pH-mètre
- Agitateur magnétique
- Cylindre gradué
- Fiole jaugée 1L
- Les produits chimiques doivent être de qualité réactif analytique.
Procédure :
1. Calculez les montants requis :
Déterminez les quantités de NaH2PO4 et Na2HPO4 nécessaires à l’aide de l’équation de Henderson-Hasselbalch :
pH =pKa + log ([A-]/[HA])
où:
- Le pH est le pH souhaité (6,8)
- pKa est la constante de dissociation acide de H2PO4- (7.21)
- [A-] est la concentration de la base (Na2HPO4)
- [HA] est la concentration de l'acide (NaH2PO4)
En réorganisant l'équation, vous obtenez :
[Na2HPO4]/[NaH2PO4] =10^(pH - pKa)
Branchez les valeurs :
[Na2HPO4]/[NaH2PO4] =10^(6,8 - 7,21) =0,1995
2. Préparez les solutions mères :
a) Solution mère de NaH2PO4 (0,1 M) :
Pesez 1,1998 g de NaH2PO4 et dissolvez-le dans de l'eau distillée dans une fiole jaugée de 100 mL. Mélanger soigneusement pour obtenir une solution mère de NaH2PO4 0,1 M.
b) Solution mère Na2HPO4 (0,1 M) :
Pesez 1,4196 g de Na2HPO4 et dissolvez-le dans de l'eau distillée dans une fiole jaugée de 100 mL. Mélanger soigneusement pour obtenir une solution mère de Na2HPO4 0,1 M.
3. Préparez le tampon phosphate :
À l’aide d’une éprouvette graduée, transférez 10 mL de la solution mère de NaH2PO4 0,1 M et 19,95 mL de la solution mère de Na2HPO4 0,1 M dans une fiole jaugée de 1 L. Assurez-vous que les solutions sont à température ambiante.
4. Ajustez le pH :
Utilisez un agitateur magnétique pour bien mélanger la solution dans le flacon. Tout en remuant, utilisez un pH-mètre pour mesurer le pH de la solution tampon. Si nécessaire, ajoutez de petits volumes de solutions mères de NaH2PO4 ou de Na2HPO4 jusqu'à ce que le pH souhaité de 6,8 soit atteint.
5. Maquiller à la hauteur :
Une fois le pH ajusté à 6,8, ajoutez de l'eau distillée jusqu'au repère 1L de la fiole jaugée. Bien mélanger pour assurer une solution homogène.
6. Revérifiez le pH :
Enfin, revérifiez le pH du tampon phosphate préparé pour vous assurer qu’il se situe dans la plage souhaitée de 6,8 ± 0,05.
Remarque :
Pour garantir un pH précis, calibrez le pH-mètre avant utilisation et stockez le tampon phosphate à une température appropriée (4°C) pour maintenir sa stabilité.