Après 240 secondes, le mélange a cessé de virer au bleu les gouttes de solution d'iode car toute la vitamine C du mélange avait été épuisée. La vitamine C est un antioxydant qui réagit avec l'iode pour former un composé incolore. Ainsi, lorsque toute la vitamine C a disparu, il ne reste plus rien pour réagir avec l'iode et le rendre bleu.