Les enzymes sont des protéines qui travaillent pour réduire l'énergie d'activation dans les réactions chimiques tout en n'étant pas consommées dans la réaction. Biologiquement, les enzymes sont des molécules essentielles qui accélèrent les réactions dans les systèmes métaboliques. En conséquence, la cinétique enzymatique étudie la vitesse de réaction des enzymes dans divers milieux chimiques. De nombreux facteurs affectent la vitesse d'une enzyme. La concentration d'un substrat, la température, les inhibiteurs et le pH influencent le seuil d'une enzyme dans une réaction chimique. À l'aide de relations linéaires telles que le tracé Lineweaver-Burk, vous pouvez trouver le taux maximal d'une enzyme.
Facilité de calcul de la Vmax dans le tracé Lineweaver-Burk

Commencez par tracer le Michaelis-Menten équation pour obtenir une courbe hyperbole. Ensuite, utilisez l'inverse de l'équation de Michaelis-Menten pour obtenir une forme d'interception de pente de l'activité enzymatique. Ensuite, vous obtiendrez le taux d'activité enzymatique comme 1 /Vo \u003d Km /Vmax (1 /[S]) + 1 /Vmax, où Vo est le taux initial, Km est la constante de dissociation entre le substrat et l'enzyme, Vmax est le taux maximum, et S est la concentration du substrat.

Puisque l'équation d'interception de pente relie le taux à la concentration du substrat, vous pouvez utiliser la formule typique de y \u003d mx + b, où y est la variable dépendante, m est la pente, x est la variable indépendante et b est l'ordonnée à l'origine. Avant un logiciel informatique spécifique, vous utilisiez du papier millimétré pour tracer la ligne. Maintenant, vous utilisez un logiciel de base de données typique pour tracer l'équation. Ainsi, connaissant le taux initial, Vo et les différentes concentrations du substrat, vous pouvez créer une ligne droite. Le tracé linéaire représente la pente de Km /Vmax et l'ordonnée à l'origine de 1 /Vmax. Ensuite, utilisez l'inverse de l'ordonnée à l'origine pour calculer la Vmax de l'activité enzymatique.
Les utilisations du tracé Lineweaver-Burk

Les inhibiteurs modifient le taux maximum de l'activité enzymatique principalement de deux manières: de manière compétitive et de manière non compétitive. Un inhibiteur compétitif se lie au site d'activation d'une enzyme bloquant le substrat. De cette manière, l'inhibiteur entre en compétition avec le substrat pour se lier au site enzymatique. Permettre une concentration élevée de l'inhibiteur compétitif assure la liaison au site. Par conséquent, l'inhibiteur compétitif modifie la dynamique du taux enzymatique. Tout d'abord, l'inhibiteur modifie la pente et l'ordonnée à l'origine Km créant une pente beaucoup plus raide. Cependant, le taux maximum, Vmax, reste le même.

D'un autre côté, un inhibiteur non compétitif se lie à un site différent du site d'activation de l'enzyme et ne rivalise pas avec le substrat. L'inhibiteur modifie les composants structurels du site d'activation empêchant le substrat ou une autre molécule de se lier au site. Ce changement affecte l'affinité du substrat pour l'enzyme. Les inhibiteurs non compétitifs modifient la pente et l'ordonnée à l'origine du tracé de Lineweaver-Burk, diminuant la Vmax tout en augmentant l'ordonnée à l'origine avec une pente plus raide. Cependant, l'ordonnée à l'origine reste la même. Bien que le tracé Lineweaver-Burk soit utile à bien des égards, le tracé linéaire présente des limites. Malheureusement, le tracé commence à déformer les taux à des concentrations de substrat très élevées ou faibles, créant des extrapolations sur le tracé.