Stratégie de lecture SERS in situ pour les cellules individuelles. (A) Le schéma de la stratégie pour améliorer la fiabilité en raccourcissant les temps de coloration. (B) Dosage de coloration X-gal pour les cellules. (C et D) Lecture SERS in situ. Les triangles rouges et noirs marquent respectivement les cellules positives et négatives. La bande bleue indique le pic marqueur des hydrolysats de X-gal. Crédit :LI Shaofei
Récemment, un groupe de recherche dirigé par le professeur Yang Liangbao des Hefei Institutes of Physical Science (HFIPS) de l'Académie chinoise des sciences (CAS) a développé in situ une stratégie de lecture de spectroscopie Raman à surface améliorée (SERS) pour améliorer la fiabilité de la bêta-galactosidase test d'activité basé sur la coloration X-gal. Des résultats de recherche pertinents ont été publiés dans Talanta.
L'activité de la bêta-galactosidase (β-gal) est fermée en relation avec les cellules de sénescence et les maladies associées au vieillissement. La coloration au X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactoside) est le dosage colorimétrique le plus largement utilisé et disponible dans le commerce avec un équipement peu coûteux et non intensif.
Cependant, la lecture traditionnelle de l'activité β-gal basée sur la coloration X-gal est limitée à une faible sensibilité dans les temps d'incubation courts et aux faux positifs dans les temps d'incubation longs. Il est difficile d'obtenir des résultats positifs constants dans la prolifération cellulaire car l'état de croissance de la cellule n'est souvent pas homogène.
Dans cette étude, les chercheurs ont révélé le rôle potentiel des hydrolysats de X-gal insolubles dans l'apparition de faux positifs. hydrolysats de X-gal, provoquant une pollution de diffusion diffuse dépendant du milieu organique, peut guider la stratégie de lecture en tant que facteur d'évasion universel.
Par conséquent, ils ont proposé la stratégie de lecture SERS in situ sensible et rapide pour identifier et localiser les cellules β-gal positives sur la base de la coloration X-gal.
Cette nouvelle stratégie s'est en outre avérée nécessaire et réalisable. Il a résolu les défis de la lecture traditionnelle, et cela sera d'une grande importance dans différentes applications telles que la recherche liée à l'âge et la thérapie anti-âge.