Les courbes d'étalonnage sont utilisées pour déterminer la concentration de substances inconnues sur la base des mesures précédentes de solutions de concentrations connues. La précision et l'exactitude des mesures dépendent de la courbe d'étalonnage. Plus la courbe est précise, plus la réponse est précise, plus la courbe est mauvaise, plus la précision est mauvaise. C'est un type de méthode de comparaison, l'inconnu est comparé à un connu. Les courbes d'étalonnage sont utilisées pour tous les types de mesures utilisant de nombreuses machines différentes. Cet exemple utilise un spectrophotomètre.

Diluer la solution étalon à différentes concentrations. Il est typique de faire une dilution de 10 fois, une dilution de 20 fois, une dilution de 30 fois ou une autre solution par étapes. Faire chaque dilution deux fois pour que tous les échantillons soient en double.

Calculer les concentrations des solutions diluées. Un exemple de la nouvelle concentration pour la dilution de 10 fois serait la concentration de la première solution multipliée par 0,10.

Lire l'absorbance des solutions diluées sur le spectrophotomètre. Insérez une cuvette dans le spectrophotomètre de sorte que le marquage du triangle soit aligné avec le trajet de la lumière. Fermez le couvercle du spectrophotomètre et appuyez sur le bouton zéro. Mettre la machine à zéro avec de l'eau distillée tous les cinq échantillons. Une fois la machine mise à zéro, lisez les échantillons de la même manière. La seule différence est que vous appuyez sur Entrée pour obtenir l'absorption. Appuyez sur Entrée après avoir fermé le couvercle. Notez ces valeurs dans un cahier.

Tracez l'absorbance par rapport aux concentrations connues calculées pour tous les échantillons. La concentration connue sera sur l'axe X et l'absorbance sur l'axe Y. Il est préférable de créer le graphique dans un programme graphique d'ordinateur.

Utilisez le programme graphique pour calculer la ligne de régression pour les points graphiques. Il est possible de supprimer l'un des deux points pour chaque dilution afin d'obtenir la meilleure ligne de régression. C'est le point de faire chaque dilution en double. Plus la valeur de R ^ 2 est proche de 1, meilleure est la ligne de régression. Prendre note de l'équation de la ligne de régression.

Lire l'absorbance de la solution de concentration inconnue sur le spectrophotomètre. Noter cette absorption.

Calculer la concentration de la solution inconnue en utilisant l'équation de la droite de régression. L'absorbance inconnue est substituée à Y dans l'équation. Vous résolvez l'équation pour X, la concentration.