* Les acides aminés ont des groupes ionisables: Chaque acide aminé a au moins deux groupes ionisables:un groupe carboxyle (-COOH) et un groupe amino (-NH2). Ces groupes peuvent gagner ou perdre des protons (H +) en fonction du pH de la solution.
* point isoélectrique (PI): Chaque acide aminé a une valeur de pH spécifique appelée point isoélectrique (PI) où sa charge nette est nulle. À ce pH, l'acide aminé existe en tant que Zwitterion (charges positives et négatives équilibrées).
* Migration dans un champ électrique: Lorsqu'elles sont soumises à un champ électrique pendant l'électrophorèse, les acides aminés avec une charge positive nette migreront vers l'électrode négative (cathode), tandis que ceux avec une charge négative nette migreront vers l'électrode positive (anode).
* Effet de pH sur la charge:
* pH en dessous de pi: L'acide aminé sera protoné, portant une charge positive nette.
* pH au-dessus de pi: L'acide aminé sera déprotoné, portant une charge négative nette.
* pH à pi: L'acide aminé n'aura pas de charge nette et ne migrera pas.
Par conséquent, le pH de la solution tampon utilisée dans l'électrophorèse influence directement la séparation des acides aminés:
* Séparation optimale: L'utilisation d'un pH légèrement différent du Pi des acides aminés garantit qu'ils ont une charge nette et migreront à différents taux, conduisant à une séparation efficace.
* Mauvaise séparation: Si le pH est trop proche du Pi d'un acide aminé, il aura une charge nette très faible et migrera lentement, entraînant une mauvaise résolution.
* pas de séparation: Si le pH est exactement au PI d'un acide aminé, il n'aura aucune charge nette et ne migrera pas du tout.
En conclusion, le PH est un facteur critique de l'électrophorèse car il détermine l'état de charge des acides aminés, influençant leur migration dans le champ électrique et dictant finalement l'efficacité de séparation.
