Évaluation des mAbs P22 par analyse Western blot et dosage immuno-enzymatique bloquant (ELISA). A) Analyse Western blot de la spécificité des anticorps monoclonaux P22 (mAbs) à la protéine P22 ciblée. La lettre majuscule entre deux chiffres dans le coin inférieur de chaque image représente le nom du mAb, KDa =kilo Dalton, M =marqueur, Lane-1 =protéine P22 recombinante chargée avec 15 µl à une concentration de 1 mg/ml et Lane- 2 =protéine de liaison au maltose (MBP) comme témoin négatif. Ces résultats ont montré que tous les mAb étaient hautement spécifiques et reconnaissaient la protéine P22 marquée au MBP au poids attendu d'environ 66 KDa. B) Évaluation de sept P22-mAbs (3B7, 3F6, 3F7, 3F8, 3E9, 4A6 et 4B6) pour leur application dans le blocage ELISA en utilisant six échantillons de sérum de porc positifs et quatre négatifs pour le virus de la peste porcine africaine (ASFV) et tous ont été inhibés pour se lier à leur antigène revêtu cible par les échantillons de sérum positifs avec un IP moyen> 92 %. Les données représentent la moyenne des résultats de trois expériences indépendantes. Crédit :Biosécurité et santé (2022). DOI :10.1016/j.bsheal.2022.04.002
La peste porcine africaine (PPA) est une maladie hautement contagieuse et mortelle des porcs. En raison de la complexité du virus ASF (ASFV) et des diverses formes cliniques de la maladie, un large éventail de tests de sérodiagnostic hautement efficaces et robustes sont nécessaires.
L'utilisation des protéines ASFV les plus antigéniques est très importante pour améliorer les tests de sérodiagnostic. Actuellement, seules quelques protéines recombinantes hautement antigéniques ont été testées et validées pour une utilisation en tant que réactifs dans les tests de sérodiagnostic de la PPA. Jusqu'à présent, trois kits ELISA basés sur les protéines recombinantes P72, P30 et PP62 ont été approuvés.
Dans une nouvelle étude publiée dans Biosafety and Health basé sur la protéine P22 recombinante, un test ELISA de blocage à base d'anticorps monoclonaux P22 hautement sensible, spécifique et rapide (mAb-bELISA) a été développé pour détecter les anticorps sériques induits par les ASFV de génotype I et II pour détecter les anticorps ASFV. Un total de 806 échantillons de sérum de porc ont été testés pour évaluer la performance du test de diagnostic. Le test a pu détecter les anticorps contre l'ASFV dès 9 jours après l'infection.
Sur la base de cette étude, le nouveau test bELISA basé sur P22-mAb peut être utilisé pour une détection rapide et précise des anticorps contre l'ASFV, qui jouera un rôle précieux dans le confinement et la prévention de l'ASF comme alternative à d'autres méthodes de diagnostic sérologique. En outre, cette étude aidera les chercheurs à étudier plus avant l'importance immunogène de la protéine P22 dans l'infection par l'ASFV. Une nouvelle méthode pour la détection rapide d'un antiviral clé