La biochimie étudie des molécules telles que l'ADN, l'ARN et les protéines. Les techniques de transfert sont ce que les scientifiques utilisent pour séparer ces types de molécules. Dans les cellules, ils existent en mélange. Le buvardage permet aux chercheurs de trouver une protéine parmi d'autres, comme une aiguille dans une botte de foin. Le transfert est généralement fait en laissant un mélange d'ADN, d'ARN ou de protéines s'écouler à travers une plaque de gel. Ce gel permet aux petites molécules de bouger plus vite que les plus grosses. Les molécules séparées sont ensuite pressées contre une membrane, ce qui permet de déplacer les molécules du gel sur la membrane. Les molécules adhèrent à la membrane, mais restent au même endroit, à l'écart l'une de l'autre, comme si elles étaient encore dans le gel.
Western Blot
Le Western blot est une technique courante de séparation protéines par taille, mais dans des colonnes droites. Ces colonnes parallèles permettent aux chercheurs de comparer la quantité d'une protéine à travers différents échantillons qui sont dirigés les uns à côté des autres, comme les pistes de bowling. Par exemple, si vous étiez en train de tester l'effet de différentes quantités d'un médicament sur la croissance cellulaire, vous traiteriez quatre groupes différents de cellules avec une quantité de médicament différente. Ensuite, vous pouvez casser les cellules ouvertes et exécuter les protéines de chaque groupe dans des voies séparées sur un gel. La dissémination des protéines de cette façon vous permet de voir ce que fait une concentration croissante de médicaments à une certaine protéine.
Les cellules peuvent être brisées pour libérer leur ARN. L'ARN de différents types de cellules peut être exécuté sur des pistes séparées sur un gel. Le gel diffuse les différents ARN par taille. Ces rangées parallèles et précises d'ARN permettent à un chercheur de comparer quel type de cellule a quelle quantité d'ARN. Cette méthode permet à un chercheur de déterminer si les cellules d'une certaine maladie ont plus de cet ARN ou moins de cet ARN. Le transfert de Northern peut révéler comment une maladie fonctionne au niveau de la production d'ARN.
Southern Blot
Le Southern Blot est la technique de transfert d'origine, qui a commencé le système de dénomination. Il a été inventé par Edwin Southern. Le transfert de Southern est utilisé pour détecter la quantité d'ADN dans un mélange. Tout comme avec les protéines et l'ARN, l'ADN d'une cellule peut être libéré lorsque cette cellule est ouverte. Le transfert de Southern sépare l'ADN de différents types cellulaires par taille. L'ADN de chaque échantillon est étalé en lignes parallèles et soignées. Des morceaux individuels d'ADN peuvent être détectés en utilisant une sonde radioactive ou fluorescente, qui est conçue pour se lier uniquement à cette partie de l'ADN. Le signal d'énergie d'une sonde radioactive, ou les éclairs de lumière provenant d'un signal fluorescent, indiquent aux chercheurs quelle part de cet ADN se trouve dans chaque échantillon.
Autres transferts
Les trois principaux transferts les techniques - occidentale, septentrionale et méridionale - ont été modifiées de différentes manières pour détecter des molécules légèrement différentes. Chaque technique modifiée est généralement effectuée de la manière habituelle, mais utilise une méthode différente pour détecter la molécule qui est étalée dans les voies parallèles. Les empreintes sud-ouest détectent les molécules de protéines collées à l'ADN. Les empreintes du nord-ouest détectent les molécules de protéine collées à l'ARN. Les transferts de Farwestern détectent des molécules de protéines collées à d'autres protéines.
