Un protocole de surexpression des protéines fait référence à toute méthode permettant à un organisme de fabriquer une protéine désirée en quantité suffisante pour une étude plus approfondie. Les scientifiques utilisent souvent les bactéries et les levures pour produire leur protéine d'intérêt spécifique, mais en théorie n'importe quel organisme pourrait fonctionner.
Signification
Pour étudier la structure ou la fonction d'une protéine particulière, vous devez avoir une quantité importante disponible pour vos tests souhaités. Certaines protéines se trouvent naturellement en grandes quantités et se purifient facilement à partir de leur organisme hôte. La plupart des protéines, cependant, se produisent en très petites quantités ou se produisent dans des organismes à partir desquels les protéines ne peuvent pas être facilement purifiées. Les protocoles de surexpression des protéines génèrent de grandes quantités de protéines désirées pour une étude plus approfondie, permettant aux scientifiques d'étudier des protéines faibles, rares, toxiques et même mutées.
Expression des protéines
Les organismes communs utilisés dans les protocoles de surexpression incluent bactéries ou levures. Les scientifiques conçoivent ces organismes pour porter un gène qui code pour une protéine désirée. Ils placent le gène sous un contrôle spécifique de sorte que l'organisme n'exprime pas ou ne fabrique pas la protéine désirée jusqu'à ce qu'il soit spécifiquement induit à le faire. Par exemple, les scientifiques peuvent concevoir un organisme pour porter un gène sous le contrôle direct d'un sucre spécifique. En l'absence de ce sucre spécifique, l'organisme se développe mais ne peut pas fabriquer la protéine. En présence du sucre, l'organisme produira beaucoup de protéines.
Considérations
De nombreux protocoles de surexpression fonctionnent, mais doivent être optimisés pour une protéine et un organisme spécifiques. L'optimisation nécessite généralement des essais et des erreurs et dépend souvent de la structure et de la fonction de la protéine. La surexpression de certaines protéines peut tuer l'organisme qui fabrique la protéine. Dans ce cas, vous devrez peut-être attendre que la population de l'organisme devienne suffisamment grande avant d'induire la production de cette protéine. Changer les organismes ou changer les types du même organisme peut aussi aider.