Voici la ventilation:
1. Illumination:
* Lumière blanche est la principale source d'éclairage dans la plupart des microscopes optiques, y compris les microscopes à fluorescence. Il illumine l'échantillon visualisé.
2. Fluorescence:
* Dans microscopie à fluorescence , des colorants spécifiques (appelés fluorophores) sont utilisés pour étiqueter l'échantillon. Ces colorants émettent la lumière d'une couleur spécifique lorsqu'ils sont excités par la lumière d'une couleur différente.
* Blue Light est souvent utilisé pour exciter les protéines fluorescentes vertes (GFP) , qui sont couramment utilisés comme marqueurs génétiques.
* lumière rouge est souvent utilisé pour exciter les protéines fluorescentes rouges (RFP) ou d'autres colorants qui émettent une fluorescence rouge.
3. Filtres:
* Le microscope utilise des filtres pour séparer la lumière d'excitation de la fluorescence émise.
* Filtre d'excitation: Ce filtre permet uniquement la longueur d'onde spécifique de la lumière qui excite le fluorophore de passer.
* Filtre d'émission: This filter only allows the specific wavelength of light emitted by the fluorophore to reach the observer.
Voici comment cela fonctionne:
1. Excitation: La lumière bleue est dirigée sur l'échantillon, excitant les molécules GFP dans l'échantillon.
2. Émission: Les molécules GFP excitées émettent un feu vert.
3. Filtrage: La lumière d'excitation rouge est bloquée par un filtre d'émission, permettant uniquement à la fluorescence verte d'atteindre l'œil de l'observateur ou la caméra.
Pourquoi utiliser le bleu et le rouge?
* Couleurs distinctes: La lumière bleue et rouge sont choisies pour leurs longueurs d'onde distinctes, leur permettant d'exciter et de détecter différents fluorophores. Cela permet la visualisation de plusieurs cibles dans un seul échantillon.
* Séparation spectrale: La lumière bleue et rouge sont relativement éloignées par rapport au spectre électromagnétique, ce qui facilite le filtre des longueurs d'onde indésirables et isolent la fluorescence spécifique.
en résumé:
* La lumière bleue et rouge est utilisée en microscopie à fluorescence pour exciter différents fluorophores, mais pas comme source d'éclairage primaire.
* Les filtres sont essentiels pour séparer la lumière d'excitation de la fluorescence émise, permettant la visualisation de cibles spécifiques dans un échantillon.
