Matériaux :
1. Eau déminéralisée
2. Phosphate monopotassique (KH2PO4)
3. Hydrogénophosphate de sodium (Na2HPO4)
4. pH-mètre
5. Agitateur magnétique ou barre d'agitation
6. Fiole jaugée (par exemple, 1 000 ml)
7. Éprouvette graduée ou pipette
Réactifs :
1. Solution de dihydrogénophosphate de potassium (KH2PO4) 0,2 M :Dissoudre 17,41 g de KH2PO4 dans 1 000 ml d'eau déminéralisée.
2. Solution d'hydrogénophosphate de sodium (Na2HPO4) 0,2 M :Dissoudre 28,48 g de Na2HPO4 dans 1 000 ml d'eau déminéralisée.
Procédure :
1. Calculez les volumes de solutions 0,2 M KH2PO4 et 0,2 M Na2HPO4 nécessaires pour préparer 1 000 ml de tampon phosphate 0,1 M à pH 7,5. Utilisez l'équation de Henderson-Hasselbalch :
pH =pKa + log ([A-]/[HA])
où:
- Le pH est le pH souhaité (7,5)
- pKa est la constante de dissociation de l'acide phosphorique (7.21)
- [A-] est la concentration de la base conjuguée (Na2HPO4)
- [HA] est la concentration de l'acide faible (KH2PO4)
Réorganiser l'équation et remplacer les valeurs :
log ([A-]/[HA]) =pH - pKa =7,5 - 7,21 =0,29
[A-]/[HA] =antilog (0,29) =1,959
À partir de la concentration de tampon souhaitée (0,1 M) et du rapport calculé ([A-]/[HA]), déterminez les volumes de solutions 0,2 M KH2PO4 et 0,2 M Na2HPO4 :
V (KH2PO4) =[HA] / [Concentration totale] * Volume total
=0,1 M / (0,1 M + 0,1 M) * 1 000 mL
=500 ml
V (Na2HPO4) =[A-] / [Concentration totale] * Volume total
=0,1 M / (0,1 M + 0,1 M) * 1 000 mL
=500 ml
2. Transférez 500 mL de solution 0,2 M KH2PO4 dans une fiole jaugée de 1 000 mL.
3. Ajoutez 500 ml de solution Na2HPO4 0,2 M dans la fiole jaugée.
4. Faites tourner doucement le flacon pour mélanger les solutions.
5. Vérifiez le pH du tampon à l'aide d'un pH-mètre. Ajustez le pH à 7,5 en ajoutant de petits volumes de solutions 0,2 M KH2PO4 ou 0,2 M Na2HPO4 selon les besoins.
6. Si nécessaire, ajoutez de l'eau déminéralisée pour porter le volume final du tampon à 1 000 mL.
7. Mélangez soigneusement le tampon à l'aide d'un agitateur magnétique ou d'un barreau d'agitation.
Votre tampon phosphate 0,1 M de pH 7,5 est désormais prêt à l'emploi. Conservez le tampon à la température appropriée pour vos conditions expérimentales.
