1. Couverture de gaz inerte :Entourez le biocatalyseur d'un gaz inerte tel que l'azote, l'argon ou l'hélium pour déplacer l'oxygène. Cela crée un environnement sans oxygène et minimise le risque d'oxydation.
2. Emballage imperméable à l'oxygène :Conserver le biocatalyseur dans des récipients hermétiques et imperméables à l'oxygène pour empêcher la pénétration d'oxygène. Des bouteilles en verre avec des bouchons en caoutchouc ou des joints en aluminium, des récipients en plastique rincés à l'azote ou des sachets en aluminium multicouche peuvent être utilisés.
3. Composition du tampon :Ajuster la composition du tampon ou du milieu réactionnel pour minimiser la solubilité de l'oxygène. Ceci peut être réalisé en ajoutant des agents réducteurs comme le dithionite de sodium, l'ascorbate de sodium ou la cystéine, qui peuvent réagir avec l'oxygène et le consommer.
4. Agents piégeurs d'oxygène :Incorporer des agents désoxygénants tels que le glucose, la glucose oxydase ou la superoxyde dismutase dans le mélange réactionnel pour éliminer les traces d'oxygène.
5. Modification enzymatique :Des techniques de mutagenèse dirigée sur site et d'ingénierie des protéines peuvent être utilisées pour introduire des mutations ou des modifications spécifiques dans le biocatalyseur qui augmentent sa résistance à l'oxygène.
6. Contrôle du potentiel redox :Maintenir le potentiel redox du milieu réactionnel en ajoutant des équivalents réducteurs ou en maintenant une concentration constante en oxygène. Ceci peut être réalisé grâce à des méthodes électrochimiques ou à l’utilisation de tampons réducteurs.
7. Stockage cryogénique :Conservez le biocatalyseur à des températures très basses (par exemple -80°C ou moins) pour ralentir les processus d'oxydation. La congélation instantanée suivie d'un stockage dans l'azote liquide peuvent préserver efficacement l'activité du biocatalyseur.
8. Protection du substrat :Parfois, le substrat lui-même est sensible à l'oxydation. Dans de tels cas, l’utilisation d’un analogue ou d’un dérivé de substrat moins sujet à l’oxydation peut protéger indirectement le biocatalyseur.
9. Chélateurs d'ions métalliques :Les agents chélateurs comme l'EDTA ou le citrate peuvent lier et éliminer des traces d'ions métalliques, ce qui peut catalyser des réactions oxydatives et endommager le biocatalyseur.
10. Protection contre la lumière :Certains biocatalyseurs sont sensibles à la lumière, notamment en présence d'oxygène. Stockez et manipulez le biocatalyseur dans des conditions sombres ou de faible luminosité pour éviter la photo-oxydation.
En employant ces stratégies, vous pouvez créer un environnement limitant l’oxygène et protéger vos biocatalyseurs des dommages oxydatifs, garantissant ainsi leur stabilité et leur longévité.
