HPLC (chromatographie liquide à haute performance) et GC (chromatographie en phase gazeuse) sont les deux méthodes utilisées par les scientifiques pour analyser les échantillons afin de déterminer ce que contient l'échantillon ou la concentration des molécules dans l'échantillon. Les deux utilisent le même principe, que les molécules plus lourdes élueront ou s'écouleront plus lentement que les plus légères (la polarité joue également un rôle dans le temps d'élution). Bien que l'idée soit la même, GC et HPLC ont plusieurs différences.
La phase mobile
La phase mobile de l'équipement de chromatographie est la substance qui déplace l'échantillon à travers la machine. En HPLC, la phase mobile est un liquide composé d'un solvant organique, d'eau ultra pure et d'autres ingrédients pour assurer sa compatibilité avec l'échantillon. GC utilise du gaz pour sa phase mobile. Les gaz utilisés comprennent l'hélium, l'azote, l'argon ou l'hydrogène, selon ce qui est analysé.
Les colonnes
Au fur et à mesure que les échantillons se déplacent sur les colonnes de chromatographie, l'échantillon et la phase mobile interagissent avec le contenu de la colonne, provoquant les composants de l'échantillon à éluer à un moment différent. Les colonnes HPLC sont généralement des tubes en métal ou en verre de quatre à six pouces de long étroitement emballés avec de la silice ou des longueurs de chaînes de carbone différentes. Les systèmes GC ont des colonnes capillaires enroulées avec des parois intérieures recouvertes de divers matériaux en fonction des besoins du laboratoire. Allongées, les colonnes GC peuvent atteindre des longueurs de 100 pieds.
Les échantillons
GC sont utilisés pour les composés volatils (ceux qui se décomposent rapidement) tandis que la HPLC est meilleure pour les échantillons moins volatils. Si un échantillon contient des sels ou porte une charge, il doit être analysé par HPLC, pas GC.
Contrôle de la température
Les colonnes GC sont logées dans un four à l'intérieur de la machine. Un ordinateur modifie la température pendant l'analyse des échantillons. Plus la température est élevée, plus l'échantillon s'élue rapidement, mais des températures trop élevées produisent de mauvais résultats. Les colonnes HPLC sont maintenues à une température stable (le plus souvent la température ambiante) à tout moment.