Les enzymes possèdent une structure tridimensionnelle définie. Tout changement dans cette structure provoque un changement dans l'activité de l'enzyme. Le pH du mélange réactionnel modifie cette structure et donc l'activité. Chaque enzyme a un pH optimal où elle montre une activité maximale. Des différences significatives de ce pH provoquent des changements dans la structure tridimensionnelle de l'enzyme qui réduisent son activité. La catéchol oxydase a un pH optimal d'environ 7.

À propos de la catéchol oxydase

Le catéchol est oxydé par la catéchol oxydase en présence d'oxygène pour former de la benzoquinone qui, lorsqu'elle est exposée à l'air, forme de la mélanine . Cette enzyme est également connue sous d'autres noms, tels que la tyrosinase, la diphénol oxydase et la polyphénol oxydase. Les pommes de terre, les pommes et les bananes contiennent de la catéchol oxydase qui agit sur le catéchol incolore et le transforme en mélanine de couleur brune. Le brunissement qui se produit lorsque vous coupez et exposez ces éléments à l'air est le résultat de cette réaction.

Extraction de la catéchol oxydase

La catéchol oxydase peut être extraite de bananes ou de pommes de terre. Écraser une banane avec deux fois le volume d'eau dans un mortier et un pilon. Alternativement, mélanger une banane avec de l'eau pour obtenir l'extrait de catéchol oxydase. Filtrer à travers la mousseline de beurre et conserver au réfrigérateur. Si vous utilisez des pommes de terre, épluchez-les et coupez-les, puis mélangez à grande vitesse en utilisant 700 ml d'eau distillée froide. Filtrer ce jus de pomme de terre à l'étamine et réfrigérer.

Détails expérimentaux

Préparer des solutions tampons avec des valeurs de pH 2, 4, 6, 7 et 8. Étiqueter cinq éprouvettes avec ces valeurs de pH. Remplissez chaque tube à une capacité d'un quart avec le tampon correspondant. Ajouter 10 gouttes d'extrait de catéchol oxydase dans chacun de ces tubes, suivis de 10 gouttes de catéchol. Agiter les tubes et noter la couleur de chaque tube sur une échelle de 0 à 5 où 0 indique aucune couleur et 5 indique une couleur brune foncée. Continuez à secouer les tubes et notez la couleur toutes les cinq minutes pendant les 20 prochaines minutes.

Interprétation des résultats

Utilisez les données que vous obtenez pour la lecture de 20 minutes pour tracer un graphique. Sur l'axe des X, indiquez le pH des tampons. Sur l'axe Y, indiquez les intensités de couleur allant de 0 à 5. Pour chaque valeur de pH, marquez l'intensité de la couleur et joignez ces marquages ​​pour obtenir le graphique final. Localiser le pic de cette parcelle et identifier le pH optimal pour la réaction de la catéchol oxydase. Pourvu que vous ayez correctement effectué l'expérience, le pH optimal sera de 7. À pH 7, l'enzyme est la plus active et catalyse rapidement l'oxydation du catéchol pour donner la couleur brun foncé.

Précautions

Les bananes ainsi que les pommes de terre contiennent du catéchol. Par conséquent, il est possible que certains de ces éléments s'oxydent pendant la réaction, ce qui contribue à l'intensité de la couleur que vous observez. Pour éviter cette réaction, gardez l'extrait de catéchol oxydase sur un bloc de glace avant de l'ajouter dans chaque tube. Le catéchol est toxique, alors assurez-vous de ne pas le laisser entrer en contact avec votre peau. Ne pas pipeter les solutions de catéchol et s'il y a un déversement, porter des gants pour le nettoyer à l'aide de serviettes en papier.