1. Test du réactif de Kovac:
* Mécanisme: Cette méthode repose sur la réaction de l'indole avec p-diméthylaminobenzaldéhyde (DMAB) , un réactif présent dans le réactif de Kovac. En présence d'acide chlorhydrique (HCl), l'indole réagit avec le DMAB pour former un composé coloré, rosindole , qui apparaît comme une bague rouge-violet à l'interface du réactif et du milieu de culture.
* étapes:
1. Ajoutez quelques gouttes du réactif de Kovac à la surface de la culture bactérienne.
2. Observez pour un cycle rouge à l'interface.
3. Un test positif indique la présence d'indole produite par les bactéries.
* spécificité: Le réactif de Kovac est très spécifique pour l'indole et ne réagit pas avec d'autres métabolites du tryptophane. Cependant, d'autres substances comme la skatole peuvent également produire une réaction de couleur similaire.
* Sensibilité: Ce test est suffisamment sensible pour détecter de petites quantités d'Indole.
2. Test du réactif d'Ehrlich:
* Mécanisme: Le réactif d'Ehrlich, contenant p-diméthylaminobenzaldéhyde (DMAB) dans un mélange d'éthanol et d'acide chlorhydrique , réagit avec Indole pour former un composé de couleur rouge-violet . Cette réaction se produit en raison de la formation d'une structure quinoïde dans le produit.
* étapes:
1. Ajoutez une petite quantité de réactif d'Ehrlich à la culture bactérienne.
2. Observer pour un changement de couleur rouge-violet.
3. Un test positif indique la présence d'Indole.
* spécificité: Semblable au réactif de Kovac, le réactif d'Ehrlich est spécifique à l'indole. Cependant, il pourrait réagir avec d'autres dérivés indole comme la skatole.
* Sensibilité: Le réactif d'Ehrlich est généralement considéré comme moins sensible que le réactif de Kovac.
Autres méthodes:
* chromatographie: L'indole peut être séparé et identifié à l'aide de la chromatographie en phase gazeuse (GC) ou des techniques de chromatographie liquide à haute performance (HPLC). Cette méthode est plus sensible et spécifique que les méthodes colorimétriques.
* spectrophotométrie: L'indole peut être détectée et quantifiée en mesurant l'absorbance de sa solution à des longueurs d'onde spécifiques à l'aide d'un spectrophotomètre.
production indole et sa signification:
* Source: Certaines bactéries, en particulier celles appartenant au genre * e. coli *, produit l'indole comme sous-produit du métabolisme du tryptophane.
* pertinence clinique: La capacité de produire de l'indole est une caractéristique utilisée dans l'identification et la différenciation bactériennes. La production d'indole peut être utilisée pour distinguer * e. coli * des autres membres d'enterobacteriaceae.
* Autres applications: L'indole a également un rôle dans la détection bactérien du quorum et peut influencer la formation et la virulence du biofilm.
Ces tests sont des outils importants en microbiologie pour identifier les bactéries et comprendre leurs capacités métaboliques.
