Techniques d'observation des jonctions cellulaires
* microscopie optique:
* Microscopie à champ lumineux: Bien que ce ne soit pas la microscopie à champ vif la plus détaillée peut fournir une vue de base de la forme des cellules et de la façon dont les cellules sont connectées.
* Microscopie à contraste de phase: Cette technique améliore le contraste à l'intérieur de la cellule, ce qui facilite la voir les contours des jonctions cellulaires.
* Microscopie de contraste d'interférence différentielle (DIC): Le DIC produit une image tridimensionnelle, presque holographique, améliorant la visualisation des jonctions cellulaires.
* Microscopie électronique (EM): Pour les détails ultrastructuraux:
* Microscopie électronique à transmission (TEM): TEM fournit des images incroyablement haute résolution. Des coupes minces de cellules sont colorées avec des métaux lourds, et les électrons passant révèlent l'architecture détaillée des jonctions cellulaires.
* Microscopie électronique à balayage (SEM): SEM crée une image 3D de la surface de la cellule, montrant plus en détail la morphologie des jonctions cellulaires.
préparations spécifiques pour étudier les jonctions cellulaires:
* Culture cellulaire: Les scientifiques utilisent souvent des cellules cultivées (cultivées dans un laboratoire) pour étudier les jonctions cellulaires. Les cellules cultivées sont plus faciles à manipuler et à observer que les cellules des tissus.
* Préparation des tissus:
* Fixation: Les cellules et les tissus sont traités chimiquement (fixe) pour préserver leur structure et empêcher la dégradation.
* intégration: Le tissu fixe est intégré dans un milieu solide comme la cire ou la résine pour le soutien pendant la section.
* Section: Les tranches minces du tissu intégré sont coupées à l'aide d'un microtome, créant des sections suffisamment minces pour la microscopie légère ou électronique.
* Talage: Des colorants et des taches spécifiques sont utilisés pour mettre en évidence différentes structures et composants cellulaires, ce qui rend les jonctions cellulaires plus visibles.
Types de jonctions cellulaires à observer:
* Jonctions serrées: Ces jonctions forment un sceau serré entre les cellules, empêchant le passage des fluides et des molécules entre eux.
* adhére les jonctions: Ces jonctions offrent une forte adhérence entre les cellules, agissant comme une «colle». Ils impliquent des protéines comme les cadhérines qui se lient aux cellules.
* desmosomes: Semblables aux jonctions adhérentes, les desmosomes offrent une forte adhésion, mais ce sont des structures en forme de taches qui relient les filaments intermédiaires des cellules adjacentes.
* jonctions d'écart: Ces jonctions agissent comme des canaux qui permettent une communication directe entre les cellules, les ions passants et les petites molécules.
Considérations importantes:
* spécificité: Les scientifiques peuvent utiliser des anticorps qui se lient spécifiquement aux protéines trouvées dans les jonctions cellulaires. Cela permet une coloration ciblée et une visualisation de types spécifiques de jonctions.
* Préparation des échantillons: Une bonne préparation des cellules ou des tissus est cruciale pour assurer l'intégrité des jonctions cellulaires et obtenir des images de haute qualité.
Exemple d'expérience:
Un scientifique veut étudier comment les jonctions serrées dans la muqueuse intestinale sont affectées par un médicament spécifique. Ils pourraient:
1. cultiver des cellules épithéliales intestinales en culture.
2. Traitez certaines cellules avec le médicament et d'autres avec une solution de contrôle.
3. Correction et prépare les cellules à la microscopie électronique.
4. Analyser les images pour comparer la structure des jonctions serrées dans les cellules traitées et non traitées.
En combinant des techniques et des analyses appropriées, les scientifiques peuvent obtenir des informations précieuses sur la structure et la fonction des jonctions cellulaires, qui sont essentielles pour l'organisation et la communication tissulaires.
