1. Coupe de l'ADN sur des sites spécifiques:
* Les enzymes de restriction reconnaissent et coupent l'ADN à des séquences spécifiques appelées sites de restriction . Ces sites sont généralement de 4 à 8 paires de bases et sont palindromiques (lisez le même en avant et en arrière).
* Chaque enzyme a un site de reconnaissance unique, permettant un ciblage précis de séquences d'ADN spécifiques.
* Lorsqu'une enzyme de restriction coupe l'ADN, elle laisse souvent les extrémités collantes , qui sont des surplombs courts et monores. Ces extrémités collantes sont complémentaires les unes aux autres et peuvent paire de bases avec d'autres extrémités collantes générées par la même enzyme.
2. Rejoindre des fragments d'ADN:
* Une fois que l'ADN a été coupé par une enzyme de restriction, différents fragments peuvent être réunis en utilisant ADN ligase .
* L'ADN ligase scelle les lacunes dans le squelette d'ADN, créant une nouvelle molécule d'ADN recombinante.
* Les extrémités collantes facilitent le processus d'adhésion, car ils s'alignent naturellement et la paire de base, maintenant les fragments ensemble jusqu'à ce que la ligase puisse sceller la liaison.
3. Applications dans la recombinaison de l'ADN:
* Clonage: Les enzymes de restriction sont essentielles pour créer des molécules d'ADN recombinantes qui peuvent être insérées dans des vecteurs (comme les plasmides) pour le clonage et l'expression.
* Édition du gène: Les enzymes de restriction sont utilisées pour couper des régions spécifiques de l'ADN, permettant l'insertion de nouveaux gènes ou la correction des défauts génétiques.
* Génie génétique: Les enzymes de restriction sont des outils cruciaux en génie génétique pour créer des organismes génétiquement modifiés (OGM) avec les traits souhaités.
En résumé, les enzymes de restriction agissent comme des ciseaux moléculaires hautement spécifiques, coupant l'ADN sur des sites spécifiques. Cette coupe précise, générant souvent des extrémités collantes, permet de joindre à différents fragments d'ADN, conduisant à la création de molécules d'ADN recombinantes.
