Une unité d'électrophorèse de gel vertical est un dispositif utilisé en biologie moléculaire et en biochimie pour séparer les molécules, principalement protéines et acides nucléiques (ADN et ARN) , en fonction de leur taille et de leur charge .
Voici une ventilation de ses principales caractéristiques:
1. Composants:
* Bac de coulée de gel: Cela contient le gel, qui est une matrice poreuse agissant comme milieu de séparation.
* plaques de verre: Deux plaques de verre verticales sandwich le gel, créant un canal étroit pour la migration des échantillons.
* Chambres de tampon: Ceux-ci contiennent le tampon d'électrophorèse, qui mène l'électricité et maintient le pH du système.
* Electrodes: Une paire d'électrodes (anode et cathode) génèrent un champ électrique qui entraîne les molécules à travers le gel.
* alimentation: Fournit un courant direct aux électrodes, créant le champ électrique pour la séparation.
* peigne: Ceci est utilisé pour créer des puits dans le gel, où les échantillons sont chargés.
2. Principe de travail:
* Le gel est généralement composé de polyacrylamide (Page) ou agarose , avec des densités variables pour contrôler la taille des pores.
* Les échantillons sont chargés dans des puits en haut du gel.
* Lorsqu'un champ électrique est appliqué, les molécules migrent à travers le gel vers l'électrode avec la charge opposée (positive pour les molécules chargées négativement, et vice versa).
* Les molécules plus petites migrent plus rapidement À travers les pores du gel, tandis que les molécules plus grandes rencontrent plus de résistance et se déplacent plus lentement.
* Il en résulte des bandes de séparation basé sur la taille, avec les plus petites molécules en bas et la plus grande en haut.
3. Applications:
* Analyse des protéines: Déterminer la taille, la pureté et la présence des protéines.
* Analyse d'ADN: Séquençage, analyse du polymorphisme de la longueur des fragments de restriction (RFLP) et clonage.
* Analyse de l'ARN: Évaluer l'expression des gènes et étudier la structure de l'ARN.
4. Avantages:
* haute résolution: Fournit une séparation claire des molécules avec de légères différences de taille.
* polyvalence: Convient à différents types d'échantillons et d'applications.
* Analyse quantitative: L'intensité de la bande peut être utilisée pour mesurer la quantité de chaque molécule.
5. Limites:
* Configuration complexe: Nécessite une préparation minutieuse et une attention aux détails.
* en temps chronométrant: Le processus d'électrophorèse peut prendre plusieurs heures.
* Capacité limitée: La taille du gel restreint le nombre d'échantillons qui peuvent être exécutés simultanément.
Dans l'ensemble, l'unité d'électrophorèse sur gel vertical est un outil essentiel pour les chercheurs dans divers domaines, fournissant des informations précieuses sur la composition et les caractéristiques des molécules biologiques.
