La principale raison pour laquelle vous colorez un spécimen avant de le passer au microscope est de mieux le voir, mais la coloration fait beaucoup plus que simplement mettre en évidence les contours des cellules. Certaines taches peuvent pénétrer dans les parois cellulaires et mettre en évidence les composants cellulaires, ce qui peut aider les scientifiques à visualiser les processus métaboliques. Les taches aident également à distinguer les cellules vivantes des cellules mortes. De plus, la coloration permet aux scientifiques de compter le nombre de cellules d'un type particulier dans une certaine biomasse. Vingt types de taches différents ou plus existent, et chacun a sa raison d'être.
TL: DR (trop long, pas lu)
Le but principal de la coloration est de mettre en évidence les cellules et parties de cellules. Il existe plus de 20 types de taches différents, et le type de tache que vous utilisez dépend de ce que vous cherchez.
Types de taches
Le choix de la tache dépend de ce que vous cherchez. Toutes les taches ne conviennent pas aux cellules vivantes, mais celles qui le sont comprennent le brun de Bismarck, le rouge de toluène, le bleu du Nil et le rouge du Nil, et certaines fluorescentes utilisées pour mettre en évidence l'ADN. Certaines taches mettent en évidence des spores, d'autres détectent des lipides et des protéines, et d'autres changent de couleur en présence d'amidons. Le but de l'examen détermine le meilleur type de colorant à utiliser. Par exemple, un médecin pratiquant un frottis PAP utiliserait de l'éosine Y. C'est un colorant fluorescent acide qui devient rouge lorsqu'il entre en contact avec les globules rouges, le cytoplasme et les membranes cellulaires. Il est également utilisé pour tester la moelle sanguine.
Dans certains cas, un investigateur peut utiliser plus d'une tache. Par exemple, l'hématoxyline est une coloration qui transforme les noyaux cellulaires en bleu. Lorsqu'il est utilisé en conjonction avec l'éosine, qui transforme les autres parties de la cellule en rouge ou en rose, il fournit un contraste plus fort et facilite la différenciation des noyaux. Les frottis de PAP et les échantillons de moelle de sang sont plus faciles à examiner lorsque ces deux colorants sont utilisés ensemble.
C'est en fait une série de colorants qui ont des effets différents sur différents types de bactéries et qui donnent aux médecins un outil de diagnostic important. La coloration de Gram est un processus en trois étapes. Dans la première, le cristal violet de Hucker est ajouté, ce qui colore toutes les bactéries d'une couleur violette uniforme. Au stade suivant, on ajoute de la coloration à l'iode, ce qui fait adhérer la couleur aux cellules Gram-positives, qui sont principalement des staphylocoques et des streptocoques. La tache est enlevée, laissant les cellules Gram-positives avec une couleur violette distincte; puis une troisième coloration, Safranine O, est introduite pour améliorer le contraste entre les bactéries Gram négatif et le reste du matériel dans la lame.
Procédure de coloration
Lors de la préparation d'un échantillon sur un glisser, vous pouvez le monter à sec ou humide-monter, vous pouvez le couper en une section mince ou vous pouvez le barbouiller. Lors de l'utilisation d'une teinture, la procédure habituelle consiste à monter l'échantillon à l'état humide, ce qui signifie placer une goutte d'eau sur la lame, placer l'échantillon dans l'eau et le recouvrir d'une lamelle. Vous appliquez ensuite la tache sur un coin de la lame avec un compte-gouttes et laissez-la aspirer par capillarité vers l'échantillon. Il est utile de mettre une serviette en papier sur le côté opposé de la lame pour attirer l'eau. Une fois la tache étalée sur toute la lame, l'échantillon est prêt à être examiné.
