HPLC offre une méthode rapide, automatisée et très précise pour identifier certains composants chimiques dans un échantillon, mais elle peut être coûteuse, complexe et ne fonctionne pas pour tous les échantillons. Les laboratoires médicaux, médico-légaux, environnementaux et de fabrication utilisent la technique pour quantifier et séparer les produits chimiques dans un échantillon. La HPLC présente à la fois des avantages et des inconvénients par rapport à d'autres techniques.
Comme les autres formes de chromatographie, la HPLC permet de séparer les constituants chimiques en utilisant une phase mobile et une phase stationnaire. phase. La phase mobile est liquide et la phase stationnaire est solide. Parce que les différents composants se déplacent à des vitesses différentes, ils se séparent les uns des autres. D'autres techniques comprennent l'électrophorèse capillaire, où les substances migrent à travers des solutions dans un champ électrique, et d'autres méthodes chromatographiques comme l'extraction en phase solide, la chromatographie en phase gazeuse et la chromatographie en couche mince.
Vitesse, efficacité et précision Comparée à d'autres techniques chromatographiques, telles que la CCM, la CLHP est extrêmement rapide et efficace. Il utilise une pompe, plutôt que la gravité, pour forcer un solvant liquide à travers un matériau adsorbant solide, avec différents composants chimiques se séparant alors qu'ils se déplacent à des vitesses différentes. Le processus peut être complété en environ 10 à 30 minutes, et il offre une haute résolution. C'est précis et hautement reproductible. Parce qu'il est largement automatisé, les analyses HPLC de base peuvent être effectuées avec une formation minimale.
Coût et complexité
Malgré ses avantages, la HPLC peut être coûteuse, nécessitant de grandes quantités de matières organiques coûteuses. Des techniques telles que l'extraction en phase solide et l'électrophorèse capillaire peuvent être moins coûteuses et même plus rapides, en particulier pour l'analyse dans de bonnes pratiques de fabrication. Bien qu'il soit relativement facile d'utiliser les méthodes HPLC existantes, il peut être complexe de résoudre les problèmes ou de développer de nouvelles méthodes. Ceci est dû en grande partie à la diversité des modules, des colonnes et des phases mobiles.
Sensibilité et résolution
En général, la HPLC est polyvalente et extrêmement précise lorsqu'il s'agit d'identifier et de quantifier des composants chimiques. Avec de nombreuses étapes, la précision de la HPLC dépend largement du processus automatisé et donc hautement reproductible. La CLHP a une faible sensibilité pour certains composés, et certains ne peuvent pas être détectés car ils sont adsorbés de manière irréversible. Les substances volatiles sont mieux séparées par chromatographie en phase gazeuse.
